Analiza HBsAg: co to jest i jak się to robi? Odszyfrowanie wyników badania na obecność markerów zapalenia wątroby typu B.

Prawie co trzecia osoba na planecie jest zarażona wirusem zapalenia wątroby typu B. Programy rządowe w wielu krajach obejmują identyfikację markerów wirusowego zapalenia wątroby typu B w populacji. Antygen HbsAg jest najwcześniejszym sygnałem infekcji. Jak rozpoznać jego obecność w ciele i jak odczytać wyniki analizy? Zrozumiemy ten artykuł.

Test HBsAg: dlaczego przydział?

Wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) to nić DNA otoczona płaszczem białkowym. Ta powłoka nazywa się HBsAg - antygen powierzchniowy hepatity B. Pierwsza odpowiedź immunologiczna organizmu, zaprojektowana w celu zniszczenia HBV, jest skierowana konkretnie na ten antygen. Po dostaniu się do krwi wirus zaczyna się aktywnie namnażać. Po pewnym czasie układ odpornościowy rozpoznaje patogen i wytwarza specyficzne przeciwciała - anty-HBs, które w większości przypadków pomagają wyleczyć ostrą postać choroby.

Istnieje kilka markerów określających zapalenie wątroby typu B. HBsAg jest najwcześniejszy z nich, z jego pomocą można określić predyspozycje do choroby, zidentyfikować samą chorobę i określić jej postać - ostrą lub przewlekłą. HBsAg obserwuje się we krwi 3–6 tygodni po zakażeniu. Jeśli ten antygen znajduje się w organizmie przez ponad sześć miesięcy w fazie aktywnej, lekarze diagnozują „przewlekłe zapalenie wątroby typu B”.

  • Ludzie, którzy nie mają objawów infekcji, mogą stać się nosicielami patogenu i nie chcą zarażać innych.
  • Z nieznanych przyczyn nosiciele antygenu występują częściej u mężczyzn niż u kobiet.
  • Nosiciel wirusa lub wirus zapalenia wątroby typu B nie może być dawcą krwi, musi się zarejestrować i regularnie wykonywać badania.

Ze względu na szerokie rozprzestrzenianie się wirusa zapalenia wątroby typu B badania przesiewowe są przeprowadzane w wielu regionach i regionach Rosji. Jeśli chcesz poddać się badaniu, każda osoba może jednak istnieć pewne grupy osób, które muszą zostać zbadane:

  • kobiety w ciąży dwukrotnie podczas całej ciąży: przy rejestracji w przychodni przedporodowej i w okresie prenatalnym;
  • pracownicy medyczni, którzy mają bezpośredni kontakt z krwią pacjentów - pielęgniarki, chirurdzy, ginekolodzy, położnicy, dentyści i inni;
  • osoby wymagające interwencji chirurgicznej;
  • osoby, które są nosicielami lub mają ostrą lub przewlekłą postać wirusowego zapalenia wątroby typu B..

Jak wspomniano powyżej, wirusowe zapalenie wątroby typu B ma dwie postacie: przewlekłą i ostrą.

Jeśli postać przewlekła nie jest konsekwencją ostrego zapalenia wątroby, prawie niemożliwe jest ustalenie, kiedy zaczęła się choroba. Wynika to z łagodnego przebiegu choroby. Najczęściej postać przewlekła występuje u noworodków, których matki są nosicielami wirusa, oraz u osób, w których krwi antygen był dłuższy niż sześć miesięcy.

Ostra postać zapalenia wątroby jest widoczna tylko u jednej czwartej zakażonych. Trwa od 1 do 6 miesięcy i ma wiele objawów podobnych do zwykłego przeziębienia: utrata apetytu, uporczywe zmęczenie, zmęczenie, ból stawów, nudności, gorączka, kaszel, katar i dyskomfort w prawym podżebrzu. Jeśli masz te objawy, należy natychmiast skonsultować się z lekarzem! Bez odpowiedniego leczenia rozpoczętego na czas osoba może zapaść w śpiączkę, a nawet umrzeć..

Jeśli oprócz powyższych objawów miałeś niezabezpieczony kontakt seksualny z nieznajomym, jeśli stosowałeś inne produkty higieny osobistej (szczoteczka do zębów, grzebień, brzytwa), należy natychmiast wykonać badanie krwi na obecność HBsAg.

Przygotowanie do analizy i procedury

Dwie metody pomagają wykryć zapalenie wątroby typu B: szybka diagnoza i serologiczna diagnostyka laboratoryjna. Pierwszy rodzaj badań nazywany jest wysokiej jakości metodami wykrywania, ponieważ pozwala dowiedzieć się, czy we krwi jest antygen, czy nie, jest to możliwe w domu. W przypadku wykrycia antygenu należy udać się do szpitala i poddać się diagnozie serologicznej, która dotyczy metod ilościowych. Dodatkowe testy laboratoryjne (ELISA i PCR) zapewniają dokładniejszą definicję choroby. Analiza ilościowa wymaga specjalnych odczynników i sprzętu.

Szybka diagnostyka

Ponieważ ta metoda niezawodnie i szybko diagnozuje HBsAg, można ją wykonać nie tylko w placówce medycznej, ale także w domu, swobodnie kupując zestaw do ekspresowej diagnostyki w dowolnej aptece. Kolejność jego wdrażania jest następująca:

  • potraktuj palec roztworem alkoholu;
  • przebij skórę za pomocą wertykulatora lub lancetu;
  • wlać 3 krople krwi do paska testowego. Aby nie zniekształcać wyniku analizy, nie dotykaj palcem powierzchni paska;
  • po 1 minucie dodać 3-4 paski roztworu buforowego z zestawu na pasek;
  • po 10-15 minutach możesz zobaczyć wynik analizy HBsAg.

Serologiczna diagnostyka laboratoryjna

Ten rodzaj diagnozy różni się od poprzedniego. Jego główną cechą jest dokładność: determinuje obecność antygenu 3 tygodnie po zakażeniu, a także jest w stanie wykryć przeciwciała anty-HBs, które pojawiają się, gdy pacjent odzyskuje zdrowie i tworzy odporność na zapalenie wątroby typu B. Ponadto, z pozytywnym wynikiem, analiza HBsAg ujawnia rodzaj wirusa zapalenia wątroby B (przewóz, postać ostra, postać przewlekła, okres inkubacji).

Analiza ilościowa jest interpretowana następująco:

Mikrobiologia i przenoszenie wirusowego zapalenia wątroby typu B. Diagnoza choroby

Wirusowe zapalenie wątroby typu B jest szeroko rozpowszechnione we wszystkich krajach świata. Choroba charakteryzuje się wyjątkowo wysokim stopniem zakaźności, rocznie zabija setki tysięcy pacjentów, jest ogromnym problemem medycznym i społecznym. Wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) atakuje głównie wątrobę. Marskość narządów i rak wątrobowokomórkowy są poważnymi powikłaniami choroby. Rezerwuarem i źródłem infekcji są pacjenci z ostrą i przewlekłą postacią choroby, którzy są bezobjawowi. Potencjał zakaźny wirusów (zakaźność) jest 100 razy wyższy niż wirus ludzki niedobór odporności. Mają wyraźną zdolność do mutacji, wysoką odporność i rakotwórczość. Patogeny w dużych ilościach znajdują się we krwi i innych płynach ustrojowych, powodując przedłużoną wiremię.

Wirusowe zapalenie wątroby typu B jest przenoszone na wiele sposobów, z których głównym jest pozajelitowe (z transfuzją krwi lub jej składników) i dożylne stosowanie narkotyków. Do zakażenia wystarczy 0,1 do 0,5 mikrona. krew. Głównym rezerwuarem infekcji są przewlekłe nosiciele antygenu HBs. Wieloczynnikowy charakter metod przenoszenia, wyjątkowo wysoki stopień odporności na wirusy w środowisku zewnętrznym oraz ogólna podatność wszystkich grup populacji na infekcje przyczyniają się do rozprzestrzeniania choroby we wszystkich krajach świata. Około 2 miliardów ludzi na świecie ma dziś objawy kontaktu z wirusowym zapaleniem wątroby typu B. Ponad 400 milionów z nich jest przewlekle zakażonych, u 20–40% z nich rozwinie się marskość wątroby lub rak wątrobowokomórkowy. Ponad 2 miliony pacjentów umiera co roku z powodu konsekwencji choroby. Dobry układ odpornościowy leczy 90% zarażonych osób. Z reguły choroba nabywa przewlekłego przebiegu u osób z wrodzonymi i nabytymi niedoborami odporności.

Figa. 1. Marskość wątroby - groźne powikłanie choroby.

Historia odkrycia patogenu

W latach 1962–1964 V. Blumberg (amerykański lekarz, biochemik, naukowiec) odkrył niezwykłe białko, antygen receptorowy związany z wirusową chorobą wątroby (zwaną później antygenem australijskim), gdy badał surowicę krwi rdzennego Australijczyka (aborygen), za który został nagrodzony w 1976 r. nagroda Nobla.

W 1968 roku A.M. Prince znalazł to białko w surowicy krwi osoby, która była w okresie inkubacji choroby, która rozwinęła się w wyniku transfuzji krwi..

W 1970 r. D. Dane odkrył pod mikroskopem elektronowym najmniejsze kuliste cząstki (cząstki Dane), które okazały się być czynnikami wywołującymi zakaźne zapalenie wątroby - wirusy zapalenia wątroby typu B..

Pierwsza szczepionka na tę chorobę została opracowana w 1977 r. W Stanach Zjednoczonych.

Figa. 2. Baruch Bloomberg (1925 - 2010) po raz pierwszy połączył antygen australijski z wirusem zapalenia wątroby typu B (wówczas nie izolowanym), który posłużył jako bodziec do opracowania skutecznej szczepionki.

Mikrobiologia

Przynależność wirusa zapalenia wątroby typu B:

  • Rodzina Hepadnaviridae.
  • Uprzejmy
  • Rodzaj wirusa zapalenia wątroby typu B..

Struktura genomu zawiera kwas dezoksyrybonukleinowy (DNA).

Figa. 3. Wiriony HBV mają zaokrąglony kształt, wyglądem przypominają granulki.

HBV to najmniejszy wirus. Jest reprezentowany przez 3 formy:

  • Cząsteczki deiny (wiriony) mają właściwości antygenowe i wykazują wyraźną zakaźność. Mają kulisty kształt. Średnica wynosi 42–47 nm. Otoczony podwójną błoną lipidowo-białkową. Jądro zawiera DNA i polimerazę zależną od DNA. Mają tropizm do tkanki wątroby.
  • Często w surowicy krwi znajdują się cząsteczki, które nie wykazują właściwości zakaźnych. Nie mają rdzenia. Niektóre z nich mają kształt kulisty (średnica wynosi 22 nm), inne mają kształt nitki (rozmiar 22 x 50 - 230 nm). Przy dużym powiększeniu widoczne jest ich poprzeczne prążkowanie. Cząstki powstają z kawałków antygenu powierzchniowego (HBsAg) i są wytwarzane w nadmiarze podczas replikacji wirusa.

Figa. 4. Na zdjęciu nukleokapsydy (NK) i cząstki utworzone z segmentów powierzchniowego (australijskiego) antygenu (HBsAg).

Struktura wirusa zapalenia wątroby typu B.

HBV składa się z nukleokapsydu otoczonego zewnętrzną powłoką. Ma kulisty kształt. Jego średnica wynosi od 40 do 48 nm.

Supercapsid HBV

Zewnętrzna powłoka wirusa (superkapsyd) składa się z lipidów. Zawiera 3 glikoproteiny lub antygeny powierzchniowe (Ag), w tym najbardziej aktywnie wytwarzane białko S, znane jako HBsAg (antygen powierzchniowy „australijski”). W chorobie HBsAg jest wytwarzany w dużych ilościach. Jego fragmenty - kuliste i nitkowate cząsteczki są obecne we krwi nawet przy braku wirionów we krwi.

Kapsyd HBV

Kapsyd ma postać dwudziestościanu, składa się ze 180 kapsomerów (strukturalnych podjednostek białkowych). Jego średnica wynosi 27 nm. Nukleokapsyd zawiera DNA i polimerazę DNA (odwrotną transkryptazę) i przyłączoną do niej kinazę białkową.

Genom jest otoczony przez białko rdzenia - HBcAg (antygen w kształcie serca). Struktura wirionu zawiera również jądrowy HbcAg i jego wydzielaną część HBeAg (antygen zakaźny), który jest uwalniany do krwi podczas replikacji wirusa i słabo zbadany HBxAg.

Figa. 5. Struktura wirusa. 1 - polimeraza DNA. 2 - DNA. 3 - jądrowy HBcAg. 4 - jądrowy HBeAg. 5 - powierzchnia HBsAg i jego fragmenty (segmenty) w kształcie sferycznym i nitkowatym.

HBV DNA

Cząsteczka DNA HBV jest w kształcie pierścienia, dwuniciowa: jeden łańcuch jest pełny - (-) nić, drugi jest krótszy (20-30% krótszy) - (+) nić. Długa nić zawiera około 3200 nukleotydów; dołączona jest do niej cząsteczka polimerazy. Krótka nić zawiera 1700 - 2800 nukleotydów. Replikacja DNA odpowiada za replikację cząstek wirusowych i syntezę białek. DNA genu S koduje HBsAg, gen C - HBcAg, gen P - polimeraza, gen X - białko - regulator ekspresji genu.

Figa. 6. Na zdjęciu po lewej stronie cząsteczki wirusowe przypominające granulki. Zewnętrzne powłoki nukleokapsydów są wyraźnie widoczne. W 2 z nich zewnętrzna skorupa jest nieobecna (zaznaczone strzałkami). Na zdjęciu po prawej stronie, na zewnętrznej kopercie wirusów, formacje przypominające kolce są wyraźnie widoczne.

Replikacja wirusów

Replikacja HBV (reprodukcja) zachodzi w komórkach wątroby - hepatocytach. Podczas tego procesu w ich cytoplazmie powstaje ogromna ilość HBsAg. Białko dostaje się do krwioobiegu, który jest ustalany laboratoryjnymi metodami diagnostycznymi. Mniej intensywnie wirusy replikują się w komórkach trzustki, nerek, limfocytów i szpiku kostnego. HBcAg w surowicy prawie nie jest wykrywane. Są one zlokalizowane w jądrach komórek. HBeAg (podjednostka HBcAg) przenika do krwi. Jego wykrycie wskazuje na aktywną replikację wirusów i ich wysoką odporność. Replikacja wirusa na obrazku poniżej..

Figa. 7. Replikacja wirusa zapalenia wątroby typu B. 1 - przenikanie wirusa do cytoplazmy komórki. 2 - zakończenie niekompletnej nici genomu DNA i utworzenie pełnego dwuniciowego okrągłego DNA. 3 - dojrzewanie genomu i jego penetracja do jądra komórkowego. 4 - w jądrze komórkowa polimeraza RNA zależna od DNA zaczyna wytwarzać różne mRNA (niezbędne do syntezy białek) i pregeny RNA (matryca do replikacji genomu wirusowego). 5 - Przeniesienie mRNA do cytoplazmy komórki i ich translacja z utworzeniem białek wirusowych. Kolekcja białek wirusa w kształcie serca wokół pregenomu. Synteza (-) nici DNA na matrycy pregenomu pod wpływem polimerazy DNA zależnej od RNA. 6 - tworzenie (+) nici DNA. 7 - tworzenie skorupy wirionu. Wyjście wirionu z komórki przez egzocytozę.

Antygeny wirusa zapalenia wątroby typu B.

Antygeny to obce białka, które po spożyciu powodują powstawanie przeciwciał. Antygenami wirusa zapalenia wątroby typu B są australijski (powierzchniowy) antygen HBsAg oraz dwa jądrowe HBcAg i HBeAg.

Antygen australijski (powierzchnia) HBsAg

Antygen australijski został odkryty przez amerykańskiego naukowca Barucha Bloomberga w 1964 roku. Nazwano go Australijczykiem (stara nazwa), ponieważ po raz pierwszy odkryto go w surowicy krwi rdzennego Australijczyka. HBsAg jest częścią superkapsydu, jest wytwarzany w dużych ilościach w chorobie od końca okresu inkubacji, utrzymuje się podczas żółtaczki, a w większości przypadków znika dopiero w okresie rekonwalescencji. Jego segmenty w postaci kulistych i włókienkowych cząstek są obecne we krwi nawet przy braku wirionów we krwi, nie mają właściwości zakaźnych.

  • Antygen powierzchniowy składa się z glikoproteiny i lipidu. W jego cząsteczkach wyróżnia się 3 białka (pre-S1, pre-S2 i S), węglowodany i lipidy. Istnieje również receptor wrażliwy na albuminę polimerazy, która promuje przenikanie wirusa do komórki.
  • HBsAg jest adsorbowany na błonach hepatocytów, jest ich wiele we krwi, są obecne w moczu, nasieniu i ślinie chorych i zdrowych nosicieli antygenów.
  • Antygen australijski ma stosunkowo niską immunogenność. Jest w stanie długo utrzymywać się w ciele pacjenta.
  • HBsAg jest odporny na detergenty (środki powierzchniowo czynne), w tym proteazy (enzymy proteolityczne).
  • Istnieje kilka podtypów antygenu australijskiego (ayw, ayr, adr i adw). Ich rozmieszczenie jest różne na różnych terytoriach, co może służyć jako względny marker epidemiologiczny wirusowego zapalenia wątroby typu B..

HBcAg (HBcorAg)

Antygen HBc jest zlokalizowany w jądrach hepatocytów. To jest nukleoproteina. Jego wydzielaną częścią jest HBeAg, który powstaje podczas konwersji białka precore do podstawowego białka strukturalnego. Znajduje się w biopatach wątroby; nie jest wydzielany do krwi. Ma wyraźną immunogenność. Jest markerem replikacji wirusa. Zidentyfikowane przez ELISA.

HBeAg

HBe jest antygenem jądrowym. To jest białko. Ma immunogenność. Znalezienie go w surowicy krwi wskazuje na zakaźność. Wysoki poziom antygenu HBe we krwi koreluje z podwyższonym poziomem cząstek Dane i wysokim mianem antygenu HBs. HbeAg można wykryć tylko za pomocą testu ELISA w cytoplazmie komórek wątroby. Metodą RIA Hbe antygen w chorobie wykrywa się w surowicy krwi w 100% przypadków.

HBxAg

Antygen HBx jest dziś słabo poznany. Uważa się, że odgrywa rolę w replikacji wirusów i rozwoju raka wątrobowokomórkowego - pierwotnego złośliwego guza wątroby (rak wątroby).

Figa. 8. Na zdjęciu wiriony HBV są sferyczne w postaci granulek i cząstek, które nie wykazują właściwości zakaźnych, sferyczne i nitkowate (segmenty HbsAg).

Genotyp wirusa

Obecnie wyizolowano 10 genotypów wirusa zapalenia wątroby typu B: A, B, C, D, E, F, G, H, I i J. Ich ustalenie pomaga zidentyfikować związek między źródłem zakażenia a pacjentem, ponieważ genotypy mają różne rozkłady geograficzne. Genotypy różnią się między sobą sekwencją nukleotydową średnio o 8%. Najczęstsze i badane są genotypy A, B, C i D..

  • Genotypy HBV A i D są wszechobecne.
  • Genotyp A najczęściej występuje w Europie, Rosji, Azji Południowo-Wschodniej, Filipinach i Afryce. Podtyp A1 - w Afryce, Azji i na Filipinach, A2 - w Europie i USA.
  • Genotyp B i C są powszechne w Japonii i Azji Południowo-Wschodniej.
  • Genotyp D jest powszechny na Bliskim Wschodzie, w Indiach i regionie Morza Śródziemnego.
  • Genotyp E jest powszechny w Afryce subsaharyjskiej.
  • Genotyp F dystrybuowany na Alasce, w Ameryce Południowej i Środkowej
  • Genotyp G występuje sporadycznie w Niemczech, Francji i USA.

Różne genotypy wirusa różnie reagują na leczenie, mają różny wpływ na wątrobę i czas trwania choroby. Tak więc wirusowe zapalenie wątroby typu B, wywołane przez wirusy o genotypie B i C, często występuje z uszkodzeniem wątroby, genotyp A - jest dobrze wyleczony lekami przeciwwirusowymi.

Figa. 9. Żółtaczka u pacjenta z zapaleniem wątroby.

Stabilność HBV

Wirus zapalenia wątroby typu B jest wysoce oporny:

  • Pozostaje żywotny przez 4 tygodnie na różnych powierzchniach i w wysuszonej krwi na ubraniach.
  • Około 5 godzin pozostaje aktywne po ekspozycji na chloroform i eter, 18 godzin - po ekspozycji na kwasy (pH = 2-3).
  • Wytrzymuje powtarzające się zamrażanie i rozmrażanie. Pozostaje aktywny do 7 dni po wysuszeniu w temperaturze 25 ° C.
  • Wirusy są inaktywowane dopiero po 10 godzinach od momentu narażenia t około 60, po 10-20 minutach od momentu wrzenia, po 1 godzinie od momentu traktowania suchym ciepłem.
  • Po ekspozycji na nowoczesne środki dezynfekujące wirus jest dezaktywowany po 60 minutach.
  • Wirusy są przechowywane na sprzęcie i urządzeniach medycznych przez kilka dni, a nawet tygodni. W strzykawkach zanieczyszczonych zainfekowaną krwią DNA wirusa trwa do 8 miesięcy.
  • HBsAg nie rozkłada się na żyletki, urządzenia do manicure, gazę, watę, bieliznę, serwetki i ręczniki przez okres do 6 miesięcy.

Wirus zabija autoklawowanie przez 45 minut wt około 120, sterylizacja suchym ogrzewaniem przez 1 godzinę wt około 180, gotowanie przez 30 minut, ogrzewanie przez 10 godzin wt około 60.

Wirus jest niszczony w środowisku alkalicznym. Nadtlenek wodoru, formalina, chloramina i fenol są szkodliwe dla HBV.

Figa. 10. Wodobrzusze w marskości wątroby. Na skórze widoczne są liczne krwotoki.

Patogeneza zapalenia wątroby typu B.

Po dostaniu się do organizmu ludzkiego wirus jest utrwalany na błonie komórkowej. Następnie przenika do komórki, gdzie odbywa się jej replikacja. Uszkodzenie komórki wątroby nie występuje w wyniku bezpośredniego cytopatycznego działania patogenu, ale w wyniku ekspozycji na cytotoksyczne kompleksy immunologiczne obejmujące HLA (kompleks zgodności tkankowej). Kompleksy immunologiczne (IR) powstają w wyniku interakcji wirusa i przeciwciał (Hbs Ag + AT). Są one skierowane zarówno na pozakomórkowe wirusy, jak i zainfekowane komórki wątroby..

Śmierć komórek wątroby prowadzi do dystrofii narządów i rozwoju zmian martwiczych. Proces patologiczny rozwija się w centrach płatków wątrobowych i obwodowo. Z biegiem czasu rozwija się zwłóknienie narządu i uszkodzenie dróg żółciowych, co prowadzi do rozwoju cholestazy - zmniejszenia przepływu żółci do dwunastnicy 12.

Aktywacja prooksydantów i hamowanie procesów przeciwutleniających prowadzi do obrzęku i obrzęku komórek wątroby, zmiany ich pH, ​​zakłócenia fosforylacji oksydacyjnej.

Podobieństwo antygenu wirusa z antygenami ludzkiego układu zgodności tkankowej prowadzi do wystąpienia reakcji autoimmunologicznych („układu”): zapalenie tarczycy, zespół Sjogrena, idiopatyczna plamica małopłytkowa, zapalenie kłębuszków nerkowych, reumatoidalne zapalenie stawów itp..

Silna odporność humoralna i komórkowa w 90% przypadków prowadzi do wyzdrowienia. Ze słabym składnikiem komórkowym układu odpornościowego proces nabiera przewlekłego przebiegu.

Figa. 11. Tłuszczowa choroba wątroby z zapaleniem wątroby.

Odporność

Odporność poinfekcyjna w wirusowym zapaleniu wątroby typu B jest intensywna i długotrwała; możliwe jest, że utrzymuje się przez całe życie. Powtarzające się przypadki choroby są niezwykle rzadkie. Rodzaj odporności humoralnej.

Figa. 12. Na zdjęciu rak wątrobowokomórkowy jest poważnym powikłaniem wirusowego zapalenia wątroby..

Rozpowszechnienie choroby

Na występowanie wirusowego zapalenia wątroby typu B mają wpływ warunki społeczne i ekonomiczne..

  • Niekorzystne regiony to Afryka, Azja Południowo-Wschodnia, Zachodni Pacyfik (Filipiny, Indonezja) i Chiny, w których częstotliwość przewozu HbsAg sięga 10–20%. Największa liczba zarażonych osób jest zarejestrowana w regionach położonych na południe od Sahary.
  • Średni poziom przewozu HBsAg (od 2 do 7%) obserwuje się w krajach Ameryki Południowej, wschodniej części Morza Śródziemnego, Europy Południowej, Azji Środkowej i Środkowej, Rosji i krajach WNP.
  • Niski poziom przewozu HBsAg (od 0,01 do 0,5%) obserwuje się w Ameryce Północnej, Australii i Europie Zachodniej.
  • W Rosji wskaźnik ten waha się od 8 do 10% w Jakucji, Tuwie i na Północnym Kaukazie, od 4 do 5% we Wschodniej Syberii i 1% w europejskiej części kraju.

Figa. 13. Występowanie przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B..

Jak przenosi się wirusowe zapalenie wątroby typu B?

Transmisja odbywa się na wiele sposobów, z których głównym jest pozajelitowy - z transfuzją krwi, jej składników i dożylnym zażywaniem narkotyków. Liberalizacja zachowań seksualnych doprowadziła do wzrostu liczby osób zakażonych wirusami zapalenia wątroby typu B poprzez kontakty seksualne. Duża część pacjentów to osoby zarażone w życiu codziennym. Do zakażenia wystarczy 0,1 do 0,5 mikrona. krew. Ryzyko zakażenia jest narażone na pracowników medycznych i pacjentów poddawanych hemodializie, uzależnionych od narkotyków, ludzi, którzy prowadzą nieregularne życie seksualne, żyjąc w niesprzyjających warunkach życia. Mnogość szlaków transmisji zapewnia szerokie zakażenie wśród ludności w wielu krajach świata. Ułatwia to wysoka odporność wirusów w środowisku oraz wysoki stopień podatności na infekcje we wszystkich grupach populacji. Czynnik wywołujący zapalenie wątroby typu B jest zakaźny przez wirusa niedoboru odporności 50 do 100 razy. W krajach o niskich socjoekonomicznych i sanitarno-higienicznych warunkach życia przy braku rozległych szczepień przeciw HBV prawie wszystkie dzieci zarażają się.

Źródło zakażenia HBV (rezerwuar patogenów)

Osoby z bezobjawowymi i przejawionymi postaciami choroby są źródłem zakażenia HBV. Pacjenci z przewlekłym aktywnym wirusowym zapaleniem wątroby typu B są głównymi źródłami infekcji od wielu lat i dziesięcioleci. Stopień zakaźnego zagrożenia zależy od aktywności procesu patologicznego.

Wirusy we krwi zakażonych pacjentów pojawiają się 2-8 tygodni przed wzrostem próbek wątroby i krążą w całym ostrym okresie oraz w okresie przewlekłego nosicielstwa, które powstaje w 5-10% przypadków.

Na świecie jest około 400 milionów pacjentów z przewlekłymi postaciami wirusowego zapalenia wątroby typu B - nosicielami HbsAg. Wszystkie z nich, jako źródła infekcji, stanowią ogromne zagrożenie. Ich stopień zakaźności zależy od aktywności procesu patologicznego w wątrobie i stężenia antygenów wirusowych w surowicy krwi. Szczególnie niebezpieczne są osoby z wrodzonymi i nabytymi niedoborami odporności: cierpiące na patologię autoimmunologiczną, nowotwory złośliwe, przewlekłe choroby narządów miąższowych, osoby poddane terapii immunosupresyjnej.

  • Pacjenci z ostrym zapaleniem wątroby typu B są niebezpieczni przez 45-60 dni okresu inkubacji, 10-14 dni podczas prodromu i 14-21 dni na etapie wyraźnych objawów klinicznych - łącznie około 65 do 95 dni. W fazie odzyskiwania stężenie HbsAg gwałtownie spada. Pacjenci zakażeni przez pacjentów z ostrym zapaleniem wątroby typu B pozostawiają 4-6% wszystkich zarażonych.
  • Pacjenci z przewlekłym aktywnym wirusowym zapaleniem wątroby typu B są bardziej zaraźliwi niż pacjenci z nieaktywną postacią choroby, pierwotnym rakiem i marskością wątroby.

U zakażonych osób HBV znajduje się w surowicy krwi, krwi menstruacyjnej, wydzielinie z pochwy, nasieniu, moczu, kale, łzach, ślinie, żółci, mleku matki, wodobrzusze i płynie owodniowym, soku trzustkowym, płynie opłucnowym i stawowym. Prawdziwym niebezpieczeństwem jest krew, sperma i ślina chorego. W innych płynach biologicznych stężenie patogenów jest bardzo niskie..

Figa. 14. Żółtaczka postaci wirusowego zapalenia wątroby. Skóra i twardówka oczu stają się żółtawe.

Trasy transmisji

Kontakt z krwią jest głównym mechanizmem przenoszenia zapalenia wątroby typu B..

Drogi przenoszenia infekcji dzielą się na naturalne i sztuczne.

  • Naturalne sposoby rozprzestrzeniania się HBV obejmują: seksualne, pionowe (od matki do dziecka), kontakt-gospodarstwo domowe.
  • Sztuczne sposoby rozprzestrzeniania HBV obejmują: procedury diagnostyczne i lecznicze (zastrzyki, transfuzje krwi, hemodializa, badania inwazyjne, przeszczepy), stosowanie niesterylnych strzykawek i igieł przez narkomanów, uszkodzenie skóry i błon śluzowych podczas tatuowania, przekłuwania, akupunktury, szczotkowania.

Transmisja pozajelitowa

Droga pozajelitowa (transfuzja krwi i jej składników) poprzednio zajmowała wiodące pozycje w strukturze głównych dróg przenoszenia infekcji (od 50 do 90%). W ostatnich latach wskaźnik ten w krajach cywilizowanych spadł do kilku procent, co jest związane z wprowadzeniem obowiązkowej procedury oznaczania HBsAg metodą ELISA dla dawców wszystkich kategorii, a następnie usunięcie osób z pozytywnymi wynikami badań z krwiodawstwa. Dzisiaj pojawia się zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B z dożylnym zażywaniem narkotyków i aktywacją narządów płciowych.

Równie ważne jest szerokie wyposażenie instytucji medycznych w narzędzia i systemy jednorazowego użytku.

Do grupy ryzyka należą pacjenci, którym wstrzyknięto krew i osocze, poddawani hemodializie, pacjenci z rakiem i hematologiczni, osoby po przeszczepie narządu.

Grupa podwyższonego ryzyka zawodowego obejmuje chirurgów, dentystów, onkologów, hematologów, położników-ginekologów, transfuzjologów, asystentów laboratoryjnych i personel medyczny z nimi współpracujący. Ta kategoria osób podlega szczepieniu priorytetowemu. Lekarze muszą zostać zaszczepieni przed rozpoczęciem studiów, pacjenci muszą zostać zaszczepieni przed przyjęciem do szpitala hematologicznego lub onkologicznego.

Figa. 15. Przez wiele lat zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B występowało głównie drogą pozajelitową (z transfuzją krwi i jej składników). Ale w ostatnich latach na pierwszy plan wysunęła się infekcja dożylnym zażywaniem narkotyków i infekcja narządów płciowych.

W ostatnich latach nastąpił znaczny wzrost przenoszenia wirusa zapalenia wątroby typu B podczas dożylnego podawania leku. Ta droga przenoszenia zakażenia ma od 30 do 60% w strukturze nowo zakażonego HBV z ostrymi postaciami choroby. Zakażenie występuje podczas używania zwykłych strzykawek, igieł i pobierania środków odurzających ze zwykłych pojemników.

Figa. 16. Utrata zasad moralnych, nadużywanie alkoholu, uzależnienie od narkotyków i rozwiązłość seksualna to główne czynniki przenoszenia zakażeń wśród młodego pokolenia.

Instrumentalna droga transmisji

Zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B może wystąpić podczas używania niesterylnych narzędzi używanych podczas procedur medycznych i diagnostycznych, podczas których naruszana jest integralność skóry i błon śluzowych: procedury dentystyczne, metody badań instrumentalnych, zastrzyki, pobieranie próbek krwi do analizy itp. To droga zakażenia wśród nowo zakażonych HBV wynosi 7-30%.

Zakażenie można przenosić za pomocą niesterylnych instrumentów stosowanych w zabiegach kosmetycznych (golenie, pedicure, manicure itp.), Piercingach i tatuażach.

Figa. 17. Zakażenie HBV można przenosić za pomocą niesterylnych instrumentów.

Transmisja wirusa zapalenia wątroby typu B z matki na dziecko

Dzieci urodzone przez matki zakażone HBV są narażone na zakażenie. W przypadku ostrego zapalenia wątroby w 1. i 2. trymestrze ciąży ryzyko zakażenia płodu jest niewielkie, aw 3. trymestrze zakażenie płodu występuje w 90% przypadków.

Zakażenie płodu występuje, gdy łożysko pęka i podczas porodu. Według statystyk infekcja wewnątrzmaciczna płodu stanowi 5–10% przypadków, infekcja płodu podczas porodu - 90–95% przypadków. W większości przypadków zapalenie wątroby u noworodków przebiega bezobjawowo, dlatego choroba nie jest u nich diagnozowana..

Przekaz seksualny

W ostatnich latach, z powodu liberalizacji stosunków seksualnych, nastąpił gwałtowny wzrost liczby przypadków przeniesienia seksualnego zakażenia HBV. W niektórych krajach odsetek przypadków ostrego zapalenia wątroby z przenoszeniem infekcji drogą płciową wynosi 18–21%. Do grupy ryzyka należą prostytutki i homoseksualiści. Przyczyną ryzyka behawioralnego wśród młodego pokolenia jest utrata zasad moralnych, alkoholizacja i rozwiązłość seksualna.

Kontakt-domowa droga zakażenia

Wirusowe zapalenie wątroby typu B może rozprzestrzeniać się wśród rodzin i zorganizowanych grup osób dorosłych i dzieci. Przyczynia się do infekcji, nieprzestrzegania zasad higieny osobistej i publicznej, złego utrzymania mieszkań (mieszkań, hosteli, domów opieki, kolonii, więzień, sierocińców i szkół z internatem). W ogniskach przewlekłych nosicieli infekcji choroba osób kontaktowych występuje w 10 - 86% przypadków. Wirusy rozprzestrzeniają się za pomocą czyichś szczoteczek do zębów, maszynek do golenia, myjek, ręczników, masażerów itp. Patogeny przenikają do organizmu ludzkiego poprzez mikrourazy na błonach śluzowych i powłokach skóry..

Osoby odwiedzające kraje z hiperendemią na zapalenie wątroby i personel opiekujący się dziećmi są narażone na zakażenie..

Wirus zapalenia wątroby typu B nie jest przenoszony przez przytulanie, ściskanie dłoni, kichanie, przez sztućce.

Figa. 18. Wodobrzusze u pacjenta z marskością wątroby - groźne powikłanie marskości wątroby.

Rozpoznanie zapalenia wątroby typu B.

Wirusowe zapalenie wątroby typu B może zagrażać życiu. U pacjentów z przewlekłymi postaciami istnieje wysokie ryzyko rozwoju marskości wątroby i pierwotnego raka wątroby (rak wątrobowokomórkowy). Terminowa diagnoza choroby umożliwia wyznaczenie odpowiedniej terapii etiotropowej i patogenetycznej. Obecnie istnieje wiele badań krwi w celu zdiagnozowania ostrych i przewlekłych form infekcji, oceny aktualnego stanu pacjenta i ustalenia rokowania choroby.

  • Diagnostyka laboratoryjna zapalenia wątroby typu B koncentruje się obecnie na wykrywaniu HbsAg (antygen powierzchniowy, antygen australijski). Badanie całej oddanej krwi na obecność HbsAg zapewniło jej bezpieczeństwo w przyszłym użyciu tego materiału biologicznego.
  • Diagnoza mikrobiologiczna opiera się na identyfikacji wirusa i identyfikacji odpowiedzi immunologicznej na niego..
  • Aby określić taktykę i rokowanie w chorobie, PCR wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV DNA PCR) jest testem ilościowym i genotypem wirusa.
  • „Złotym standardem” w diagnostyce zapalenia wątroby jest biopsja wątroby.
  • Badanie histologiczne materiału biopsyjnego pozwala ustalić formę nosologiczną (hepatoza lub zapalenie wątroby), nasilenie procesu zapalnego i zwłóknienie narządu.
  • Obowiązkowe podczas badania pacjenta z podejrzeniem zapalenia wątroby typu B jest badanie surowicy krwi na obecność wirusów zapalenia wątroby typu C, D i HIV, identyfikacja współistniejącej patologii.

ALT i AST w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B.

Nasilenie uszkodzenia wątroby można ocenić na podstawie poziomu enzymów wątrobowych w surowicy. Szczególną uwagę zwraca się na enzym ALT, który w chorobie wzrasta 1,5 do 2 razy. Aktywność AST jest nieco niższa. Odwrotny stosunek obserwuje się wraz z postępem choroby i rozwojem marskości wątroby. Poziom aminotransferaz pozostaje prawidłowy u pacjentów w fazie tolerancji immunologicznej, nieaktywnego przewozu iu niektórych pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu HBeAg.

Obowiązkowa dla oceny działania podstawowych funkcji wątroby jest kontrola parametrów biochemicznych, takich jak g-glutamylotranspeptydaza (g-GT), fosfataza alkaliczna, bilirubina, albumina osoczowa i globuliny, czas protrombinowy.

Zmniejszenie albuminy, wzrost g-globulin i wzrost czasu protrombiny (często towarzyszy temu zmniejszenie liczby płytek krwi) są charakterystycznymi objawami marskości wątroby. Spadek poziomu wskaźnika protrombiny poniżej 40% wskazuje na krytyczny stan pacjenta.

Figa. 19. Straszna konsekwencja wirusowego zapalenia wątroby - marskość wątroby (makrodek).

PCR dla WZW typu B (HBV DNA PCR)

HBV DNA PCR jest pierwszym markerem diagnostycznym choroby. Wirusy DNA pojawiają się w surowicy krwi po 4 tygodniach od wystąpienia choroby, HbsAg - po 2-8 tygodniach. Metoda ma wysoką dokładność, swoistość i czułość. Wskaźnik jest zwykle wyrażany w IU / ml. Jeśli wynik jest wyrażony w kopiach, wówczas wartość w IU / ml jest dzielona przez „5”. Analiza ilościowa pozwala ocenić stopień miana wirusa i służy do oceny skuteczności leczenia..

W przypadku zakażenia zmutowanymi szczepami HBV (w obszarze precore genomu) wydzielanie HBeAg jest upośledzone, a jedyną metodą potwierdzającą replikację wirusa w tym przypadku jest PCR HBV.

Figa. 20. HBV DNA PCR - pierwszy marker diagnostyczny choroby.

Biopsja wątroby

„Złotym standardem” w diagnostyce zapalenia wątroby jest biopsja wątroby. Badanie histologiczne materiału biopsyjnego pozwala ustalić postać nosologiczną (hepatoza lub zapalenie wątroby), nasilenie procesu zapalnego i zwłóknienie narządu. W przypadku klinicznych objawów marskości wątroby lub obowiązkowego przepisania leczenia przeciwwirusowego, niezależnie od stopnia zwłóknienia / marskości wątroby, nie wykonuje się biopsji.

Figa. 21. Biopsja wątroby - „złoty standard” w diagnozowaniu zapalenia wątroby.

Antygeny

Antygeny to obce białka, które po spożyciu powodują powstawanie przeciwciał. Antygenami wirusa zapalenia wątroby typu B są australijskie (powierzchniowe) HBsAg i dwa jądrowe (rdzeniowe) HBcAg i HBeAg. Test immunoenzymatyczny (ELISA) służy do wykrywania antygenów..

HBsAg (powierzchowny antygen australijski)

HbsAg (białko) jest markerem zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B. Jego ogromna ilość powstaje w cytoplazmie zainfekowanych komórek. Obecność tego antygenu w surowicy krwi ustala laboratoryjne metody diagnostyczne. HbsAg ma 2 fragmenty polipeptydu. Jednym z nich jest fragment preS, który ma właściwości immunogenne (powoduje powstawanie przeciwciał; służy do przygotowania szczepionek), drugi to fragment preS2 (receptor polioliglobulinowy, który promuje adsorpcję HBV na hepatocytach).

  • HbsAg zaczyna być wykrywane w surowicy krwi pacjenta w ostrym okresie 2–8 tygodni po infekcji (pod koniec okresu inkubacji), jest określany w okresach anterterycznych i żółtaczkowych, a następnie znika w okresie rekonwalescencji, który występuje po 2–6 miesiącach, jeśli choroba zakończy się pomyślnie. Spadek stężenia antygenów w surowicy występuje pod wpływem reakcji immunologicznych.
  • W ciężkich postaciach zapalenia wątroby typu B antygeny powierzchniowe w surowicy krwi określa się podczas wystąpienia pierwszych objawów żółtaczki.
  • Rejestracja HbsAg przez ponad 6 miesięcy wskazuje na przewlekłość procesu infekcji, którą obserwuje się u 10–20% pacjentów.

HBcorAg (HBcAg)

Rdzeń HBcorAg (nukleoproteina) jest zlokalizowany tylko w jądrach hepatocytów. HBcorAg wskazuje na replikację wirusa, ma wyraźną immunogenność.

Ten rodzaj antygenu występuje tylko w próbkach z biopsji wątroby i materiale z sekcji zwłok; nie jest wydzielany do krwi. Wydzielaną częścią HBcorAg jest HBeAg, który powstaje podczas konwersji białka precore do podstawowego białka strukturalnego.

HBeAg

HBeAg (antygen jądrowy) wskazuje na aktywną replikację wirusa i wysoki stopień zakażenia krwi pacjenta. Pojawia się równolegle z HbsAg w surowicy krwi w ostrym okresie choroby od końca okresu inkubacji, istnieje przez krótki czas, ponieważ jest eliminowany pod wpływem wytworzonych przeciwciał, co jest uważane za dobry znak prognostyczny. W przypadku mutacji wirusów jądrowy HbeAg jest nieobecny.

HBxAg

HBxAg jest najmniej badany. Uważa się, że ich obecność wskazuje na złośliwą transformację komórek wątroby..

  • Ostre zapalenie wątroby typu B charakteryzuje się pojawieniem się w surowicy krwi antygenu Hbs i przeciwciał IgM przeciwko HBcAg (antygen jądrowy). Pojawienie się przeciwciał w jądrowym antygenie HBe wskazuje na wysoki poziom replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B (HBV) i jest wskaźnikiem wysokiej zakaźności pacjenta..
  • W przewlekłym zapaleniu wątroby obserwuje się stałą (co najmniej 6 miesięcy) obecność HbsAg. Ten antygen w tym okresie jest wskaźnikiem ryzyka przewlekłego procesu.

Figa. 22. Nukleokapsyd (NK) i cząstki utworzone z segmentów powierzchniowego (australijskiego) antygenu HBsAg.

Przeciwciała

Odpowiedź immunologiczna zarażonej osoby objawia się wytwarzaniem przeciwciał przeciwko niektórym antygenom patogennego mikroorganizmu. Wirusowe zapalenie wątroby typu B wytwarza przeciwciała przeciwko antygenom, takim jak HBcAg, HBeAg i HbsAg. Pojawienie się przeciwciał (serokonwersja) wskazuje na korzystny przebieg procesu zakaźnego.

Przeciwciała przeciwko antygenowi powierzchniowemu (anty-HBs, anty-Hbs)

Anty-Hbs pojawiają się w surowicy krwi pacjenta po zniknięciu antygenów Hbs po 2-6 miesiącach. Brak przeciwciał anty-Hbs tłumaczy się ich aktywnym wiązaniem z antygenami HBsAg. W niektórych przypadkach występuje okres, w którym we krwi nie ma antygenów ani przeciwciał (okres okna serologicznego).

  • Gdy tylko surowica zacznie być wykrywana w surowicy, tylko przeciwciała przeciwko antygenowi powierzchniowemu anty-Hbs, mówią o tworzeniu odporności na HBV.
  • W obecności klinicznych objawów choroby i ujemnych wyników HBsAg obecność przeciwciał jest ważnym diagnostycznym markerem infekcji..
  • Immunoglobuliny klasy IgM wskazują na ostry etap lub zaostrzenie przewlekłego zapalenia wątroby. Są one ustalane w ciągu 1-2 miesięcy. Immunoglobuliny klasy IgG pojawiają się na etapie odzyskiwania i są obecne w surowicy krwi po odzysku przez wiele lat.
  • Opóźnione wytwarzanie przeciwciał lub brak przeciwciał wskazuje na słabą odpowiedź immunologiczną i przewlekły proces.
  • Wykrycie w surowicy krwi tylko anty-Hbs wskazuje na poprzednią chorobę.
  • Przeciwciała przeciwko fragmentom HbsAg preS1 - i preS2 mają działanie ochronne (wskazują na rozwój odporności po zakażeniu lub odporności po szczepieniu).

Przeciwciała przeciw HBcAg (anty-HBcor IgM i IgG)

Przeciwciała przeciwko antygenowi jądrowemu HBc IgM są najbardziej pouczającymi i niezawodnymi markerami ostrej infekcji lub aktywacji przewlekłej postaci procesu zakaźnego wraz z HbsAg. Są one wykrywane równolegle z HbsAg od końca okresu inkubacji i utrzymują się przez cały okres objawów klinicznych zapalenia wątroby typu B, a nawet, w niektórych przypadkach, pozostają w surowicy krwi jako słabo pozytywna odpowiedź przez następne 1–2 lata. Ich zniknięcie wskazuje na reorganizację organizmu lub rozwój integracyjnej fazy choroby.

Przeciwciała przeciwko antygenowi jądrowemu HBc IgG po wyeliminowaniu wirusów pozostają w surowicy krwi przez wiele lat. Funkcja ochronna nie jest wykonywana. Ich obecność wskazuje na obecną infekcję lub chorobę z przeszłości. U pacjentów z przewlekłym zapaleniem wątroby pojawienie się przeciwciał przeciwko HBcAg (HBcorAg) IgG wskazuje na koniec choroby.

Przeciwciała przeciw HBeAg (anty-HBeAg)

Przeciwciała przeciw HBeAg pojawiają się w fazie powrotu do zdrowia i, w niektórych przypadkach, utrzymują się przez 10 do 20 lat (czasami dłużej) po ostrym wirusowym zapaleniu wątroby typu B.

Figa. 23. Przeciwciała są wytwarzane przez komórki układu odpornościowego pacjenta w odpowiedzi na antygeny patogenne. Im wyższa odpowiedź immunologiczna, tym wyższe stężenie przeciwciał w surowicy krwi.

Główne markery wirusowego zapalenia wątroby typu B (tabela)

Okresy choroboweKluczowe markery wirusowego zapalenia wątroby typu B.
Okres wylęganiaPCR w kierunku WZW typu B jest pierwszym markerem diagnostycznym choroby. Reakcja staje się dodatnia po 4 tygodniach od początku choroby.
HbsAg zaczyna być wykrywane w surowicy krwi pacjenta w ostrym okresie choroby - 2 do 8 tygodni po infekcji (pod koniec okresu inkubacji), są określane w okresach antertycznych i żółtaczkowych, a następnie znika w okresie rekonwalescencji, to znaczy po 2 do 6 miesiącach, jeśli się powiedzie leczy.
Pod koniec okresu inkubacji można wykryć HbeAg w surowicy i IgM anty-HBcor..
Ostry okresW ostrym okresie głównymi markerami zakażenia są HbsAg i HBeAg, a także anty-HBcor IgM, HBV DNA i polimeraza DNA.
W przypadku braku HbsAg w surowicy krwi pacjenta diagnozę ustala się na podstawie wykrywania przeciwciał klasy M: IgM anty-HBcor i IgM anty-HBe.
W ciężkich postaciach wirusowego zapalenia wątroby typu B w surowicy krwi HbsAg określa się wraz z pojawieniem się pierwszych objawów żółtaczki.
↓ limfocyty T, ↓ supresory T, ↑ T-pomocnicy.

Wraz z rozwojem zespołu cholestatycznego biochemiczny zespół cholestazy (+).

W ostrym okresie anicterycznym ↑ ALT.Okres rekonwalescencji(+) analiza dla przeciwciał HBcIgG i HBeIgG. Po 1-3 miesiącach. normalizacja ALT rozpoczyna się od początku choroby.Chronizacja procesuO przewlekłości tego procesu świadczy długotrwałe (ponad 6 miesięcy) utrzymywanie się antygenów: HBsAg i HbeAg.Leczyć przewlekłe zapalenie wątroby typu B.U pacjentów z przewlekłym zapaleniem wątroby pojawienie się przeciwciał IgG przeciw HBcAg wskazuje na koniec choroby.Przeszłe zakażenieMarkerem wczesnej choroby jest wykrycie przeciwciał przeciw HBc IgG i anty-HBs.Przewóz HBV (wcześniej leczone zapalenie wątroby lub odpowiedź na szczepionkę przeciw wirusowemu zapaleniu wątroby typu B).Wykrywanie anty-HBs.

Figa. 24. Marskość wątroby - wyjątkowo niekorzystny wynik przewlekłej postaci choroby.

Badania nad wirusem zapalenia wątroby typu B (ELISA i PCR)

Antygeny wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg)

Antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B w surowicy jest zwykle nieobecny.
Wykrywanie antygenu powierzchniowego wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg) potwierdza ostre lub przewlekłe zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B.

W ostrej chorobie HBsAg wykrywa się w surowicy krwi w ciągu ostatnich 1-2 tygodni okresu inkubacji i pierwszych 2-3 tygodni okresu klinicznego. Krążenie HBsAg we krwi może być ograniczone do kilku dni, dlatego należy dążyć do wczesnego wstępnego badania pacjentów. Metoda ELISA może wykryć HBsAg u ponad 90% pacjentów. U prawie 5% pacjentów najbardziej wrażliwe metody badawcze nie wykrywają HBsAg, w takich przypadkach etiologia wirusowego zapalenia wątroby B jest potwierdzona obecnością JgM anty-HBcAg lub PCR.

Stężenie HBsAg w surowicy dla wszystkich postaci ciężkości zapalenia wątroby typu B na wysokości choroby ma znaczny zakres wahań, jednak istnieje pewien wzorzec: w ostrym okresie istnieje odwrotna zależność między stężeniem HBsAg w surowicy a ciężkością choroby.

Wysokie stężenie HBsAg częściej obserwuje się w łagodnych i umiarkowanych postaciach choroby. W ciężkich i złośliwych postaciach stężenie HBsAg we krwi jest często niskie, a u 20% pacjentów z ciężką postacią i u 30% ze złośliwym antygenem antygen krwi może w ogóle nie zostać wykryty. Pojawienie się przeciwciał przeciw HBsAg u pacjentów z tym tłem jest uważane za niekorzystny objaw diagnostyczny; jest określany dla złośliwych postaci zapalenia wątroby typu B..

W ostrym wirusowym zapaleniu wątroby typu B stężenie HBsAg we krwi stopniowo maleje, aż antygen całkowicie zniknie. HBsAg znika u większości pacjentów w ciągu 3 miesięcy od wystąpienia ostrej infekcji.

Zmniejszenie stężenia HBsAg o ponad 50% do końca trzeciego tygodnia ostrego okresu z reguły wskazuje na prawie całkowite zakończenie procesu infekcji. Zazwyczaj u pacjentów z wysokim stężeniem HBsAg na wysokości choroby wykrywa się go we krwi przez kilka miesięcy.
U pacjentów z niskim stężeniem HBsAg znika znacznie wcześniej (czasem kilka dni po wystąpieniu choroby). Ogólnie okres wykrywania HBsAg wynosi od kilku dni do 4-5 miesięcy. Maksymalny okres wykrywania HBsAg w łagodnym przebiegu ostrego zapalenia wątroby typu B nie przekracza 6 miesięcy od początku choroby.

HBsAg można wykryć u zdrowych osób, zwykle w badaniach profilaktycznych lub losowych. W takich przypadkach badane są inne markery wirusowego zapalenia wątroby typu B - badane są anty HBcAg JgM, anty HBcAg JgG, anty HBeAg i czynność wątroby.

Jeśli wynik jest ujemny, konieczne jest powtórzenie testu HBsAg..
Jeśli powtarzane badania krwi przez ponad 3 miesiące ujawnią HBsAg, pacjent ten jest uważany za przewlekłego wirusowego pacjenta z wirusowym zapaleniem wątroby typu B..
Obecność HBsAg jest dość częstym zjawiskiem. Na świecie jest ponad 300 milionów przewoźników i około 10 milionów przewoźników w naszym kraju.
Zaprzestanie krążenia HBsAg, a następnie serokonwersja (tworzenie anty-HBs) zawsze wskazuje na powrót do zdrowia - reorganizacja organizmu.

Badanie krwi na obecność HBsAg stosuje się w następujących celach:

do diagnozy ostrego zapalenia wątroby typu B:

  • okres wylęgania;
  • ostry okres choroby;
  • wczesny etap rekonwalescencji;

do diagnozy przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B;

w przypadku chorób:

  • trwałe przewlekłe zapalenie wątroby;
  • marskość wątroby;

do badań przesiewowych i identyfikacji pacjentów zagrożonych:

  • pacjenci z częstymi transfuzjami krwi;
  • pacjenci z przewlekłą niewydolnością nerek;
  • pacjenci z wielokrotną hemodializą;
  • pacjenci ze stanami niedoboru odporności, w tym AIDS.

Ocena wyników badania

Wyniki badania są wyrażone jakościowo - pozytywnie lub negatywnie. Negatywny wynik testu wskazuje na brak HBsAg w surowicy. Wynik dodatni - wykrycie HBsAg wskazuje na inkubację lub ostry okres ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B, a także przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B.

Przeciwciała przeciwko antygenowi wirusa zapalenia wątroby typu B JgG (anty-HBcAg JgG)

Normalne JgG anty-HBcAg w surowicy jest nieobecne.
U pacjentów z anty-HBcAg JgG pojawia się w ostrym okresie wirusowego zapalenia wątroby typu B i utrzymuje się przez całe życie. Anti-HBcAg JgG - wiodący marker HBV.

Badanie krwi na obecność anty-HBcAg JgG służy do diagnozowania:

  • przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu B w obecności antygenu HBs w surowicy;
  • przeniesione zapalenie wątroby typu B..
  • Ocena wyników badania

    Wynik badania wyraża się jakościowo - pozytywnie lub negatywnie. Ujemny wynik testu wskazuje na brak JgG anty-HBcAg w surowicy. Wynik dodatni - wykrycie JgG anty-HBcAg wskazuje na ostre zakażenie, rekonwalescencję lub wcześniej przenoszone wirusowe zapalenie wątroby typu B.

    Antygen wirusa zapalenia wątroby typu B „e” (HBeAg)

    Normalne HBeAg w surowicy jest nieobecne.
    HBeAg można znaleźć w surowicy krwi większości pacjentów z ostrym wirusowym zapaleniem wątroby typu B. Zwykle znika we krwi przed antygenem HBs. Wysoki poziom HBeAg w pierwszych tygodniach choroby lub wykrycie go przez ponad 8 tygodni daje powód do podejrzenia przewlekłej infekcji.

    Antygen ten często występuje w przewlekłym czynnym zapaleniu wątroby o etiologii wirusowej. Szczególnie interesujące w oznaczaniu HBeAg jest fakt, że jego wykrycie charakteryzuje aktywną fazę replikacyjną procesu infekcji. Stwierdzono, że wysokie stężenia HBeAg odpowiadają wysokiej aktywności polimerazy DNA i charakteryzują się aktywną replikacją wirusa.

    Obecność HBeAg we krwi wskazuje na jego wysoką zakaźność, tj. obecność aktywnego zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B w ciele pacjenta i jest wykrywana tylko w obecności antygenu HBs we krwi. U pacjentów z przewlekłym czynnym zapaleniem wątroby leki przeciwwirusowe stosuje się tylko po wykryciu HBeAg we krwi. HBeAg - antygen - marker ostrej fazy i replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B..

    Badanie krwi na obecność antygenu HBe służy do diagnozowania:

  • okres inkubacji wirusowego zapalenia wątroby typu B;
  • okres prodromalny wirusowego zapalenia wątroby typu B;
  • ostry okres wirusowego zapalenia wątroby typu B;
  • przewlekłe trwałe wirusowe zapalenie wątroby typu B..
  • Ocena wyników badania

    Wynik badania wyraża się jakościowo - pozytywnie lub negatywnie. Negatywny wynik testu wskazuje na brak HBeAg w surowicy. Wynik dodatni - wykrycie HBeAg wskazuje na inkubację lub ostry okres ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B lub ciągłą replikację wirusa i zakaźność pacjenta.

    Przeciwciała przeciw antygenowi wirusa zapalenia wątroby typu B „e” (anty-HBeAg)

    Anty-HBeAg w surowicy jest zwykle nieobecny. Pojawienie się przeciwciał anty-HBeAg zwykle wskazuje na intensywną eliminację wirusa zapalenia wątroby typu B z organizmu i niewielką infekcję pacjenta.

    Przeciwciała te pojawiają się w ostrym okresie i trwają do 5 lat po zakażeniu. W przewlekłym przewlekłym zapaleniu wątroby anty-HBeAg występuje we krwi pacjenta wraz z HBsAg. Serokonwersja, tj. przejście HBeAg na anty-HBeAg, z przewlekłym czynnym zapaleniem wątroby, jest często korzystne prognostycznie, ale taka sama serokonwersja z ciężką marskością wątroby nie poprawia rokowania.

    Badanie krwi na obecność anty-HBeAg stosuje się w następujących przypadkach w diagnozie wirusowego zapalenia wątroby typu B:

  • ustalenie początkowego stadium choroby;
  • ostry okres infekcji;
  • wczesny etap rekonwalescencji;
  • rekonwalescencja;
  • późny etap rekonwalescencji.
  • diagnoza niedawno przeniesionego wirusowego zapalenia wątroby typu B;
  • diagnoza przewlekłego przetrwałego wirusowego zapalenia wątroby typu B..
  • Ocena wyników badania

    Wynik badania wyraża się jakościowo - pozytywnie lub negatywnie. Negatywny wynik testu wskazuje na brak przeciwciał przeciwko HBeAg w surowicy. Pozytywnym wynikiem jest wykrycie przeciwciał przeciwko HBeAg, które mogą wskazywać na początkowy etap ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B, ostry okres infekcji, wczesny etap rekonwalescencji, rekonwalescencję, niedawne wirusowe zapalenie wątroby typu B lub trwałe wirusowe zapalenie wątroby typu B.

    Kryteria obecności przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B to:

  • wykrywanie lub okresowe wykrywanie DNA HBV we krwi;
  • stały lub okresowy wzrost aktywności ALT / AST we krwi;
  • oznaki morfologiczne przewlekłego zapalenia wątroby w badaniu histologicznym biopsji wątroby.
  • Wykrywanie wirusa zapalenia wątroby typu B metodą PCR (jakościowo)

    Wirus zapalenia wątroby typu B we krwi zwykle nie występuje.
    Jakościowe oznaczenie wirusa zapalenia wątroby typu B metodą PCR we krwi pozwala potwierdzić obecność wirusa w ciele pacjenta, a tym samym ustalić etiologię choroby.

    To badanie dostarcza użytecznych informacji do diagnozy ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B podczas inkubacji i wczesnego okresu choroby, gdy główne markery serologiczne we krwi pacjenta mogą być nieobecne. Wirusowe DNA w surowicy wykrywa się u 50% pacjentów bez HBeAg. Czułość analityczna metody PCR wynosi co najmniej 80 cząstek wirusa w 5 μl, które przeszły próbkę DNA, swoistość - 98%.

    Ta metoda jest ważna w diagnozowaniu i monitorowaniu przewlekłego HBV. Około 5-10% przypadków marskości wątroby i innych przewlekłych chorób wątroby jest spowodowanych przewlekłym przenoszeniem wirusa zapalenia wątroby typu B. Markerami aktywności takich chorób są obecność HBeAg i DNA wirusa zapalenia wątroby typu B we krwi.

    Metoda PCR pozwala na oznaczenie DNA wirusa zapalenia wątroby typu B we krwi zarówno jakościowo, jak i ilościowo. Identyfikowalny fragment w obu przypadkach jest unikalną sekwencją DNA genu białka strukturalnego wirusa zapalenia wątroby typu B..

    Wykrywanie DNA wirusa zapalenia wątroby typu B w biomateriałach za pomocą PCR jest konieczne do:

  • rozstrzyganie wątpliwych wyników badań serologicznych;
  • identyfikacja ostrego stadium choroby w porównaniu z infekcją lub kontaktem;
  • monitorowanie skuteczności leczenia przeciwwirusowego.
  • Zniknięcie DNA wirusa zapalenia wątroby typu B z krwi jest oznaką skuteczności terapii

    Wykrywanie wirusa zapalenia wątroby typu B metodą PCR (ilościowo)

    Ta metoda dostarcza ważnych informacji na temat intensywności rozwoju choroby, skuteczności leczenia i rozwoju oporności na aktywne leki..
    Do diagnozy wirusowego zapalenia wątroby metodą PCR w surowicy krwi stosuje się systemy testowe, których czułość wynosi 50-100 kopii w próbce, co umożliwia wykrycie wirusa w stężeniu 5 X 10 ^ 3-10 ^ 4 kopii / ml. PCR w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B jest z pewnością niezbędny do oceny replikacji wirusa.

    Wirusowe DNA w surowicy wykrywa się u 50% pacjentów bez HBeAg. Materiałem do wykrywania DNA wirusa zapalenia wątroby typu B może być surowica, limfocyty, hepatobioptaty.

    • Ocena poziomu wiremii jest następująca:
    • mniej niż 2,10 ^ 5 kopii / ml (mniej niż 2,10 ^ 5 IU / ml) - niska wiremia;
    • od 2,10 ^ 5 kopii / ml (2,10 ^ 5 IU / ml) do 2,10 ^ 6 kopii / ml (8,10 ^ 5 IU / ml) - średnia wiremia;
    • ponad 2,10 ^ 6 kopii / ml - wysoka wiremia.

    Istnieje związek między wynikiem ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B a stężeniem DNA HBV we krwi pacjenta. Przy niskim poziomie wiremii proces przewlekłego zakażenia jest bliski zeru, ze średnią - przewlekłość tego procesu obserwuje się u 25-30% pacjentów, a przy wysokim poziomie wiremii ostre wirusowe zapalenie wątroby typu B najczęściej staje się przewlekłe.

    Wskazania do leczenia przewlekłego HBV interferonem alfa należy wziąć pod uwagę obecność markerów aktywnej replikacji wirusa (wykrycie HBsAg, HBeAg i DNA HBV w surowicy w ciągu ostatnich 6 miesięcy)..

    Kryteriami oceny skuteczności leczenia jest zanik HBeAg i DNA HBV we krwi, któremu zwykle towarzyszy normalizacja transaminaz i długotrwała remisja choroby, DNA HBV znika z krwi w 5. miesiącu leczenia u 60%, w 9. miesiącu - u 80% pacjentów. Obniżenie poziomu wiremii o 85% lub więcej do trzeciego dnia od rozpoczęcia leczenia w porównaniu z początkowym służy jako szybkie i dość dokładne kryterium przewidywania skuteczności terapii.