Wirusowe zapalenie wątroby typu B. Określenie formy i stadium choroby

Kompleksowe badanie potwierdzonego wirusowego zapalenia wątroby typu B (HBV). Analiza markerów infekcji pozwala ustalić stadium kliniczne choroby, status immunologiczny pacjenta, a także ocenić skuteczność leczenia. Obejmuje oznaczanie białek wirusa (antygenów), głównych klas specyficznych przeciwciał, a także wykrywanie DNA wirusa we krwi.

Jaki biomateriał można wykorzystać do badań?

Jak przygotować się do badania?

  • Wyklucz tłuste potrawy z diety na 24 godziny przed badaniem.
  • Nie pal 30 minut przed testem..

Przegląd badań

Wirusowe zapalenie wątroby typu B (HBV) jest chorobą zakaźną, która powoduje poważne uszkodzenie wątroby. Często zapalenie wątroby typu B staje się przewlekłe, jego przebieg staje się przewlekły i wywołuje marskość wątroby i raka wątroby.

Wirus zapalenia wątroby typu B (Hepadnaviridae) zawiera dwuniciowy DNA otoczony nukleokapsydem 27 nm, który zawiera antygen HBcAg, oraz zewnętrzną powłokę zawierającą antygen HBsAg. Antygen ten znajduje się we krwi 6 tygodni przed wystąpieniem objawów choroby i może być wykryty przez długi czas zarówno w ich obecności, jak i podczas ich nieobecności (w przewlekłym zapaleniu wątroby i nosicielstwie). We wczesnych stadiach choroby występuje u 90–95% pacjentów.

Wirus zapalenia wątroby typu B cechuje się tym, że dostaje się on bezpośrednio do krwioobiegu i krąży w nim przez cały okres choroby. U niektórych pacjentów wirus we krwi trwa przez całe życie. Z tego powodu źródłem infekcji mogą być nie tylko ci, którzy mają zapalenie wątroby w ostrej postaci, ale także ci, którzy już cierpieli na tę chorobę, a także ludzie, którzy nie wykazują choroby, ale są nosicielami wirusa.

Całkowite wyleczenie odnotowano u 92–95% pacjentów z ostrym wirusowym zapaleniem wątroby typu B, a tylko 5-8% z nich przechodzi w przewlekłą postać choroby.

Wirusowe zapalenie wątroby typu B jest leczone wyłącznie w warunkach szpitalnych. Ta choroba w przypadku przedłużonego przebiegu jest czynnikiem ryzyka rozwoju pierwotnego raka wątrobowokomórkowego (rak wątroby).

W życiu wirusa zapalenia wątroby typu B wyróżnia się dwie fazy: fazę replikacji i fazę integracji. W fazie replikacji wirus się rozmnaża (mnoży). Wirusowe DNA wchodzi do jądra hepatocytów, gdzie do syntezy nukleokapsydu zawierającego wirusowe DNA, antygeny HBcAg, antygeny HBeAg, które są głównym celem układu odpornościowego, stosuje się polimerazę DNA. Nukleokapsyd migruje następnie z jądra do cytoplazmy, gdzie białka otoczki zewnętrznej (HBsAg) są replikowane, a zatem składa się kompletny wirion. W tym przypadku nadmiar HBsAg, niewykorzystany do złożenia wirusa, dostaje się do krwioobiegu przez przestrzeń międzykomórkową. Kompletny montaż (replikacja) wirusa kończy się prezentacją jego rozpuszczalnego antygenu nukleokapsydowego - HBeAg na błonie hepatocytów, gdzie jest „rozpoznawany” przez immunocyty. Antygen HBcAg nie jest określany metodami serologicznymi, ponieważ nie występuje we krwi w postaci wolnej. Obecność przeciwciał we krwi (anty-HBc) wobec tego antygenu, wytwarzanych z powodu jego wysokiej immunogenności.

Markery fazy replikacji wirusa zapalenia wątroby typu B to:

  • wykrywanie antygenów krwi HBeAg i anty-HBc (Ig M).

U 7-12% pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B możliwe jest spontaniczne przejście fazy replikacji do fazy niereplikacyjnej (w tym przypadku HBeAg znika z krwi i pojawia się anty-HBe). Jest to faza replikacji, która określa nasilenie uszkodzenia wątroby i zakaźność pacjenta.

W fazie integracji fragment wirusa zapalenia wątroby typu B niosący gen HBsAg jest zintegrowany (osadzony) w genomie hepatocytów (DNA), a następnie powstaje głównie HBsAg. W tym samym czasie replikacja wirusa ustaje, ale aparat genetyczny hepatocytów kontynuuje syntezę dużych ilości HBsAg.

Wirusowe DNA można zintegrować nie tylko z hepatocytami, ale także z komórkami trzustki, ślinianek, leukocytów, plemników, komórek nerki.

Fazie integracyjnej towarzyszy tworzenie remisji klinicznej i morfologicznej. W tej fazie w większości przypadków powstaje stan immunologicznej tolerancji na wirusa, co prowadzi do zatrzymania aktywności procesu i przenoszenia HBsAg. Integracja sprawia, że ​​wirus jest nieosiągalny dla kontroli immunologicznej.

Markery serologiczne fazy integracji:

  • obecność we krwi tylko HBsAg lub w połączeniu z anty-HBc (IgG);
  • brak wirusa DNA we krwi;
  • Serokonwersja HBeAg do anty-HBe (tj. Zniknięcie HBeAg z krwi i pojawienie się anty-HBe).

Pacjenci, którzy mieli infekcję i mają przeciwciała przeciwko wirusowi, nie mogą zostać ponownie zarażeni wirusem zapalenia wątroby typu B. W niektórych przypadkach całkowite wyleczenie nie następuje i osoba ta staje się przewlekłym nosicielem wirusa. Nosiciel wirusa może przebiegać bezobjawowo, ale w niektórych przypadkach rozwija się przewlekłe aktywne wirusowe zapalenie wątroby typu B. Kluczowym czynnikiem ryzyka aktywnego nosiciela wirusa jest wiek, w którym dana osoba została zarażona: u niemowląt poziom ryzyka przekracza 50%, podczas gdy u dorosłych utrzymuje się na poziomie 5-10%. Badania pokazują, że mężczyźni częściej stają się nosicielami niż kobiety.

HBsAg - antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B.

Antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg) jest białkiem obecnym na powierzchni wirusa. Znajduje się we krwi z ostrym i przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B. Najwcześniejszy marker. Osiąga maksimum w ciągu 4-6 tygodnia choroby. Trwa do 6 miesięcy z ostrym zapaleniem wątroby, ponad 6 miesięcy - z przejściem choroby w postać przewlekłą.

HBeAg - wirusowe zapalenie wątroby typu B, jądro E.

Antygen zlokalizowany w rdzeniu wirusa. Pojawia się we krwi jednocześnie z HBsAg i utrzymuje się przez 3-6 tygodni. HBeAg pojawia się we krwi pacjenta z ostrym zapaleniem wątroby typu B jednocześnie z HBsAg lub po nim i pozostaje we krwi przez 3-6 tygodni. Wskazuje na aktywne rozmnażanie i wysokie ryzyko przeniesienia wirusa podczas kontaktu seksualnego, a także okołoporodowo. Zakaźność surowicy dodatniej pod względem HBeAg jest 3-5 razy większa niż surowicy dodatniej pod względem HBsAg. Wykrywanie HBeAg we krwi przez ponad 8-10 tygodni wskazuje na przejście choroby w postać przewlekłą. W przypadku braku aktywności replikacyjnej wirusa podczas przewlekłego zakażenia HBeAg nie jest wykrywany. Jego pojawienie się wskazuje również na reaktywację wirusa, która częściej występuje na tle immunosupresji.

W leczeniu wirusowego zapalenia wątroby typu B zanik HBeAg i pojawienie się przeciwciał przeciwko antygenowi HBe wskazują na skuteczność terapii.

anty-HBc (Ig M) - swoiste przeciwciała klasy IgM na antygen jądrowy „rdzeniowy” wirusa

Rozpocząć produkcję nawet przed objawami klinicznymi, wskazują na aktywną replikację wirusa.

Pojawiają się we krwi po 3-5 tygodniach, utrzymują się przez 2-5 miesięcy i znikają w okresie rekonwalescencji.

anty-HBc - całkowite przeciwciała (IgM + IgG) przeciwko antygenowi „rdzeniowemu” wirusa zapalenia wątroby typu B.

Ważny marker diagnostyczny, szczególnie z ujemną wartością HBsAg. Przeciwciała IgM powstają po 3-5 tygodniach. Przeciwciała IgG zaczynają być wytwarzane od 4 do 6 miesiąca i mogą przetrwać do końca życia. Potwierdź kontakt ciała z wirusem.

anty-HBs - całkowite przeciwciała przeciwko antygenowi powierzchniowemu wirusa zapalenia wątroby typu B.

Pojawiają się powoli, osiągając maksimum po 6-12 miesiącach. Wskazać wcześniejsze zakażenie lub obecność przeciwciał po szczepieniu. Wykrywanie tych przeciwciał wskazuje na odzyskanie i rozwój odporności. Wykrycie przeciwciał o wysokim mianie w pierwszych tygodniach choroby może być związane z rozwojem hiperimmunizacyjnego wariantu piorunującego zapalenia wątroby typu B.

anty-HBe - przeciwciała przeciwko antygenowi „e” wirusa zapalenia wątroby typu B.

Pojawiają się w 8–16 tygodniu po zakażeniu u 90% pacjentów. Wskazują koniec ostrego okresu choroby i początek okresu rekonwalescencji. Może utrzymywać się do 5 lat po chorobie.

HBV (DNA) - DNA wirusa zapalenia wątroby typu B.

Marker obecności i replikacji wirusa. Za pomocą PCR wirusowe DNA można określić jakościowo lub ilościowo. Dzięki wysokiej jakości metodzie potwierdzono obecność wirusa zapalenia wątroby typu B w organizmie i jego aktywne rozmnażanie. Jest to szczególnie ważne w złożonych przypadkach diagnostycznych. W przypadku zakażenia zmutowanymi szczepami wirusowymi wyniki testów dla określonych antygenów HBsAg i HBeAg mogą być negatywne, ale ryzyko rozprzestrzenienia się wirusa i rozwoju choroby u zarażonej osoby pozostaje.

Jakościowe oznaczanie wirusowego DNA odgrywa ważną rolę we wczesnym wykrywaniu wirusowego zapalenia wątroby typu B u osób z wysokim ryzykiem zakażenia. Materiał genetyczny wirusa wykrywa się we krwi kilka tygodni wcześniej niż HBsAg. Dodatni wynik PCR przez ponad 6 miesięcy wskazuje na przewlekłe zakażenie. Oznaczenie miana wirusa (ilość DNA wirusa we krwi) pozwala ocenić prawdopodobieństwo przewlekłej choroby.

Podwyższony poziom aminotransferaz wątrobowych z dodatnim wynikiem PCR jest wskaźnikiem potrzeby leczenia. Podczas leczenia wirusowego zapalenia wątroby typu B zanik DNA wirusa wskazuje na skuteczność leczenia.

Do czego służy badanie??

  • Aby ocenić profil serologiczny;
  • wyjaśnić etap choroby i stopień zaraźliwości;
  • w celu potwierdzenia choroby i wyjaśnienia jej postaci (ostra, przewlekła, nosiciel);
  • monitorować przebieg przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B;
  • ocenić skuteczność terapii przeciwwirusowej.

Kiedy zaplanowane jest badanie?

  • Jeśli pacjent ujawni antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B (HBsAg);
  • jeśli istnieje podejrzenie zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B i wątpliwe wyniki testów serologicznych;
  • z mieszanym zapaleniem wątroby (połączone wirusowe zapalenie wątroby B i C);
  • z dynamicznym monitorowaniem pacjentów z zapaleniem wątroby typu B (określanie etapu procesu we wspólnym badaniu innych specyficznych markerów zakażenia).

Co oznaczają wyniki??

Dla każdego wskaźnika zawartego w kompleksie:

Ostre zapalenie wątroby typu B. Istnieje „dziki” szczep (naturalny) i „zmutowany” szczep (typ) wirusa. Określenie szczepu wirusa ma szczególne znaczenie przy wyborze leczenia przeciwwirusowego. Zmutowane szczepy wirusów są nieco mniej uleczalne niż dzikie.

Przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu B (HVGV). Istnieją trzy opcje serologiczne:

  1. HVGV o minimalnej aktywności (wcześniej używany termin „karetka HBsAg”);
  2. HBe-ujemny HVHV;
  3. HBV-dodatni HVHV.

Interpretacja kombinacji markerów serologicznych zapalenia wątroby typu B.

PCR - diagnoza wirusa zapalenia wątroby typu B (ilościowo)

Badanie mające na celu zidentyfikowanie czynnika wywołującego wirusowe zapalenie wątroby typu B (HBV), w którym obecność materiału genetycznego (DNA) wirusa i jego ilości (miana wirusa) w próbce krwi jest określana za pomocą metody reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym.

DNA HBV można wykryć w stężeniu przekraczającym dolną granicę liniowego zakresu stężeń. Liniowy zakres stężeń to zakres, w którym można obliczyć dokładną liczbę kopii patogenu. Dla tej analizy liniowy zakres stężeń DNA HBV określony przez wzmacniacz wykrywający wynosi 7,5 × 102–1,0 × 108 kopii / ml próbki.

Reakcja łańcuchowa polimerazy w czasie rzeczywistym.

Kopiuj / ml (kopia na mililitr).

Jaki biomateriał można wykorzystać do badań?

Jak przygotować się do badania?

Nie pal przez 30 minut przed oddaniem krwi.

Przegląd badań

Wirusowe zapalenie wątroby typu B (HBV) jest zakaźną chorobą wątroby spowodowaną wirusem zapalenia wątroby typu B zawierającym DNA (HBV). Spośród wszystkich przyczyn ostrego zapalenia wątroby i przewlekłej infekcji wirusowej wirus zapalenia wątroby typu B jest uważany za jeden z najczęstszych na świecie..

W Rosji liczba przewoźników HBV przekracza 5 milionów osób.

Źródłem zakażenia jest pacjent z HBV lub bezobjawowym nosicielem wirusa. HBV jest przenoszony z krwią i innymi płynami ustrojowymi. Możesz zarazić się seksem bez zabezpieczenia, używając niesterylnych strzykawek, transfuzji krwi i przeszczepu narządów dawcy, matka może zarazić dziecko podczas porodu lub po nim (przez pęknięcia sutków).

Do grupy ryzyka należą: pracownicy medyczni, którzy mogą mieć kontakt z krwią pacjenta, pacjenci poddawani hemodializie, osoby zażywające narkotyki dożylnie, osoby aktywne seksualnie, dzieci urodzone przez matki z HBV.

Okres inkubacji choroby wynosi od 4 tygodni do 6 miesięcy. Wirusowe zapalenie wątroby typu B może występować zarówno w postaci łagodnych postaci, które trwają kilka tygodni, jak i w postaci długotrwałej przewlekłej infekcji. Główne objawy zapalenia wątroby: zażółcenie skóry, gorączka, nudności, zmęczenie, w badaniach laboratoryjnych - upośledzona czynność wątroby i specyficzne antygeny wirusa zapalenia wątroby typu B. Ostra choroba może szybko doprowadzić do śmierci, stać się przewlekłą infekcją lub doprowadzić do całkowitego wyzdrowienia. Uważa się, że po przeniesionym HBV powstaje stabilna odporność. Przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu B wiąże się z rozwojem marskości wątroby i raka wątroby.

Istnieje korelacja między stężeniem wirusa we krwi a wynikiem ostrego wirusowego zapalenia wątroby typu B. Przy niskim poziomie wiremii prawdopodobieństwo przewlekłej infekcji jest bliskie zeru, a zarażona osoba nie jest niebezpieczna dla innych. Przy wysokim poziomie wirusa (10 ^ 5 kopii / ml (2 * 10 ^ 4 j.m./ml) - wysoki poziom wirusa, aktywny proces infekcji (konieczna jest terapia przeciwwirusowa).

  • > 1,0 * 10 ^ 8 kopii / ml (> 4,8 * 10 ^ 7 IU / ml) - DNA wirusa zapalenia wątroby typu B wykryto w stężeniu powyżej liniowego zakresu stężeń.
    • Ocena ilościowa DNA wirusa zapalenia wątroby typu B jest niezbędnym testem przed leczeniem przeciwwirusowym. W trakcie leczenia analizę należy powtórzyć po 3-6 miesiącach.
    • Wirusowe zapalenie wątroby typu B często łączy się z wirusowym zapaleniem wątroby typu D..

    Analiza PCR dla WZW typu B.

    Wirus zawierający DNA z rodziny Hepadnaviridae jest bezpośrednim czynnikiem wywołującym WZW typu B. Analiza PCR w kierunku WZW typu B, pozwala określić obecność wirusa DNA we krwi pacjenta. Wynik dodatni dla DNA HBV pokazuje obecność infekcji we krwi pacjenta. Warto zauważyć, że diagnoza za pomocą analizy PCR pozwala nie tylko określić obecność infekcji, ale także jej obciążenie ilościowe i aktywność. Ta metoda jest niezawodna, dokładna i powtarzalna. Oznaczanie ilościowe DNA HBV za pomocą qPCR może być wykorzystane do monitorowania skuteczności terapii HBV i może być przydatne w zrozumieniu naturalnej historii HBV.

    Proces zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B zachodzi przez kontakt domowy lub seksualny lub bezpośredni kontakt z zakażoną krwią. Po zakażeniu wirus dostaje się do komórek wątroby, w których kontynuuje swoją aktywną reprodukcję. W krwiobiegu patogenne komórki rozprzestrzeniają się po całym ciele. Warto zauważyć, że wirus zapalenia wątroby typu B jest wysoce odporny na kwas i wysoką temperaturę. Jest w stanie zachować jego niesamowite właściwości przez sześć miesięcy..

    Rodzaje PCR w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B.

    Do tej pory istnieją dwa rodzaje diagnostyki, które są przypisywane podejrzanemu wirusowi zapalenia wątroby typu B: wysokiej jakości PCR (pozwala na określenie obecności wirusa we krwi z absolutną dokładnością) i ilościową PCR (pozwala określić stopień aktywności wirusa).

    Jakościowa PCR jest zalecana, jeśli istnieje podejrzenie zakażenia HBV lub jeśli inne metody diagnostyczne nie dały wyraźnego wyniku. Odszyfrowanie tego typu analizy PCR jest niezwykle proste: negatywne (wirus nie został wykryty we krwi), pozytywne (wirus został wykryty we krwi). Głównym zadaniem analizy jakościowej jest ustalenie obecności zainfekowanych komórek we wczesnych stadiach choroby. Jeśli wirus został zdiagnozowany dwa tygodnie po rzekomej infekcji, skuteczność leczenia będzie o rząd wielkości wyższa. Jeśli wirus znajduje się we krwi przez około dwa miesiące, choroba przyjmuje postać przewlekłą, dlatego nie można go całkowicie wyleczyć.

    Jeśli diagnoza jakościowa potwierdzi obecność HBV we krwi, lekarz przepisze analizę ilościową.

    Analiza ilościowa pozwala określić aktywność rozwoju wirusa w ciele pacjenta. Ten typ analizy PCR jest zalecany:

    • w celu ustalenia stadium choroby;
    • monitorować skuteczność zastosowanej terapii;
    • w celu ustalenia poziomu odporności wirusa na określony lek;
    • do wyboru leków.

    Wskaźniki ilościowe wirusa we krwi są mierzone w IU na mililitr lub DNA na mililitr.

    W przypadku, gdy lekarz natychmiast zaleci diagnozę ilościową bez sprawdzania jakości, wskaźniki wynoszą 75 IU na mililitr. Jeśli znaleziono mniej jednostek międzynarodowych, wynik - HBV nie jest wykrywany, gdy wskaźniki przekraczają normę, diagnozuje się obecność wirusowego zapalenia wątroby typu B.

    Dekodowanie analizy ilościowej

    Następujące wskaźniki (w kopiach / mililitrach) są uważane za normę ChRL w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B: mniej niż 10 3 - wirus jest nieaktywny; od 104 do 105 - wirus jest zwykle nieaktywny; 10 6 - wirus jest aktywny; 10 7 - wirus na wysokim poziomie aktywności.

    Na podstawie wskaźników ilościowych można z absolutną dokładnością określić formę choroby (nosiciel, ostry lub przewlekły), odpowiedź wirusa na leczenie, potrzebę dodatkowej diagnostyki.

    Przewlekła postać wirusowego zapalenia wątroby typu B zostaje ustalona, ​​jeśli aktywność wirusa wynosi 105 kopii na mililitr. Przewóz jest diagnozowany, jeśli ilość jest mniejsza niż 105 kopii na mililitr..

    W okresie leczenia konieczne jest (regularnie co trzy miesiące) poddawanie się wielokrotnej diagnozie ilościowej w celu ustalenia w czasie momentu, w którym wirus rozwija odporność na stosowane leki i zmiany techniki. Jeśli wszystkie badania zostały przeprowadzone prawidłowo i wybrano skuteczne leczenie, powtórna analiza (po trzech dniach leczenia) wykaże spadek aktywności komórek chorobotwórczych o co najmniej osiemdziesiąt pięć procent.

    Biopsję wątroby wykonuje się, gdy w ciągu sześciu miesięcy leczenia wartości ALT są dwa razy wyższe niż normalne, a diagnostyka PCR wykazuje wskaźniki poniżej 105 kopii na mililitr krwi.

    Przygotowanie ankiety

    Do analizy wymagana jest krew żylna. Aby uzyskać jak najdokładniejsze wyniki, musisz przygotować się do zabiegu: nie jedz co najmniej osiem godzin przed pobraniem krwi; przez dwa dni odmawiać leczenia (bez ostrzeżenia lekarza o przyjmowaniu narkotyków); przed oddaniem krwi musisz spędzić dwadzieścia minut w trybie spoczynku; Dwanaście godzin przed zabiegiem porzuć ćwiczenia sportowe, alkohol, palenie i spożywanie tłustych potraw.

    Ważne: jeśli diagnoza jest konieczna dla dziecka w wieku do pięciu miesięcy, musi on sześćdziesiąt minut przed pobraniem krwi, aby podać łyżkę przegotowanej wody co dziesięć minut.

    Podsumowując

    Analiza PCR w kierunku WZW typu B jest obecnie najdokładniejszą metodą diagnozowania wirusa. Metoda pozwala zidentyfikować zmutowane i ukryte formy choroby, zdiagnozować chorobę w pierwszych dniach infekcji, dlatego wybierz najskuteczniejsze leczenie. Asystent laboratoryjny porównuje wyniki analizy z normą, a następnie dochodzi do wniosku. Dane przetwarzane są w ciągu kilku dni. Aby otrzymać skierowanie do analizy PCR, musisz skontaktować się z hepatologiem, specjalistą chorób zakaźnych lub wirusologiem. Ważne jest, aby pamiętać, że im szybciej dotrzesz do lekarza, tym szybciej zostaną osiągnięte wyniki, tym bardziej skuteczne będzie leczenie..

    Więcej świeżych i odpowiednich informacji zdrowotnych na naszym kanale Telegram. Subskrybuj: https://t.me/foodandhealthru

    Specjalność: specjalista chorób zakaźnych, gastroenterolog, pulmonolog.

    Całkowite doświadczenie: 35 lat.

    Wykształcenie: 1975–1982, 1MI, San Gig, wyższe kwalifikacje, specjalista chorób zakaźnych.

    Stopień naukowy: doktor najwyższej kategorii, kandydat nauk medycznych.

    Trening:

    1. Choroba zakaźna.
    2. Choroby pasożytnicze.
    3. Warunki awaryjne.
    4. HIV.

    Test na zapalenie wątroby typu B.

    Wirusowe zapalenie wątroby typu B nie występuje bardzo często, ponieważ istnieje szczepionka, która zapobiega infekcji wirusem patogenu. Dzieci są szczepione natychmiast po urodzeniu, a później następuje szczepienie po osiągnięciu dorosłości.

    Jednak częstość występowania zapalenia wątroby typu B jest wysoka. Rozpoznanie tej choroby jest dość proste. Konieczne jest jedynie poddanie się badaniu PCR (reakcja łańcuchowa polimerazy). Za pomocą analizy można zidentyfikować DNA wirusa zapalenia wątroby typu B. Aby dokonać dokładniejszej diagnozy, przeprowadza się badanie ilościowe..

    Traktują BPV w sposób ściśle konserwatywny. Pacjentowi przepisuje się interferony, kompleksy multiwitaminowe, hepatoprotektory, leki przeciwwirusowe. Przyjrzyjmy się bardziej szczegółowo patogenezie choroby i dowiedzmy się, w których przypadkach konieczne jest wykonanie badania PCR i jak prawidłowo go rozszyfrować.

    Patogeneza i cechy wirusowego zapalenia wątroby typu B.

    Wirusowe zapalenie wątroby typu B (w skrócie HRV) jest chorobą wirusową, w której obserwuje się proces zapalny w komórkach wątroby. Dolegliwość może prowadzić do wzrostu wątroby i zmiany jej struktury. W przypadku braku terminowej terapii zapalenie wątroby ustaje w marskości wątroby lub stłuszczeniu wątroby.

    Czynnikiem sprawczym BPV jest wirus zawierający DNA z rodziny hepatadawirusów (w skrócie HBV lub HBV). Antygen czynnika zakaźnego został odkryty dopiero w 1964 roku. Charakterystyczną cechą wirusa jest to, że jest on wyjątkowo odporny na czynniki chemiczne i fizyczne..

    Tak więc czynnik zakaźny nie umiera przy gwałtownych zmianach temperatury, pod wpływem zamarzania, a także przy długotrwałej ekspozycji na kwaśne środowisko. Ponadto lekarze twierdzą, że HBV może utrzymywać się w temperaturze pokojowej do kilku tygodni. Na przykład czynnik zakaźny może utrzymywać się na maszynce zarażonej osoby, w plamach krwi, na różnych instrumentach medycznych. Według różnych szacunków około 300 tysięcy osób cierpi na ostre infekcje dróg oddechowych.

    Istnieją 4 sposoby przenoszenia czynnika zakaźnego:

    1. Seksualny. Przy niezabezpieczonym kontakcie seksualnym dochodzi do urazu błon śluzowych narządów płciowych, w wyniku czego wirus kilkakrotnie łatwiej dostaje się do krwioobiegu, a stamtąd do żyły wrotnej i wątroby. HBV nie jest przenoszony podczas chronionego stosunku płciowego. Nawiasem mówiąc, infekcja pocałunkami i uściskami jest uważana za niemożliwą.
    2. Pionowy sposób. Czynnik zakaźny może spaść na łożysko. Możliwe jest również zakażenie podczas przejścia dziecka przez kanał rodny. Ale prawie niemożliwe jest zarażenie się mlekiem matki.
    3. Krajowy. Możesz zostać zarażony, jeśli zdrowa osoba używa tych samych produktów higieny osobistej z nosicielem wirusa.
    4. Pozajelitowe, to znaczy przez krew. Tak więc HBV można zarazić odwiedzając kliniki dentystyczne, studia tatuażu, salony piękności, manicure, pedicure i pokoje do piercingu. Zakażenie jest możliwe podczas transfuzji krwi, podczas przeszczepu narządu, podczas hemodializy, podczas zabiegów chirurgicznych.

    Wirusowe zapalenie wątroby typu B nie jest przenoszone przez unoszące się w powietrzu kropelki. A w kontakcie z ludzkimi płynami biologicznymi (plemniki, ślina, wydzieliny narządów wewnętrznych, wydzieliny menstruacyjne i pochwowe) prawdopodobieństwo zakażenia pozostaje.

    Test PCR na obecność DNA wirusa

    Przygotowanie analizy

    Jak już wspomniano powyżej, aby zdiagnozować, musisz przejść PCR zapalenia wątroby typu B. Aby badanie było dokładne, pacjent musi przestrzegać kilku prostych zasad. Pierwszą i najważniejszą rzeczą jest przeprowadzenie analizy na czczo. To jedyny sposób na uzyskanie dokładnego wyniku. Możesz pić wodę w dniu badania.

    Ponadto w przeddzień badania zdecydowanie zaleca się, aby nie przyjmować napojów alkoholowych. Najlepiej byłoby powstrzymać się od picia alkoholu co najmniej 3-5 dni przed pobraniem krwi. Zdarzają się przypadki, gdy z powodu spożywania alkoholu osoba otrzymała wynik fałszywie dodatni lub fałszywie ujemny. Chociaż dziś uważa się to za prawie niemożliwe, ponieważ PCR jest bardzo dokładną analizą.

    • Zakaz palenia w dniu nauki.
    • W przeddzień poddania się przestrzegaj diety.
    • Na zalecenie lekarza przestań brać leki, które w pewnym stopniu mogą wpłynąć na wynik.
    • Unikaj ćwiczeń.

    Jeśli dana osoba jest już poddawana terapii przeciwwirusowej, nie jest konieczne przerywanie przyjmowania leku w przeddzień PCR. Cena kompleksowego badania PCR w prywatnych laboratoriach (Sinevo, Hemotest itp.) Zaczyna się od 2000 rubli..

    Analiza jakościowa

    Wysokiej jakości analiza PCR pomaga wykryć DNA HRV. Jest przepisywany nie tylko w przypadku podejrzenia zapalenia wątroby typu B. Badanie jakościowe jest zalecane dla osób, które przechodzą lub przeszły leczenie przeciwwirusowe. PCR można podać osobom mieszkającym z zarażoną osobą.

    Celem wysokiej jakości PCR jest wykrycie DNA czynnika wirusowego. Deszyfrowanie jest bardzo proste. Analiza jakościowa daje wynik dodatni lub ujemny. W pierwszym przypadku wykryto wirusa, w drugim - nie.

    Ale jest jedno zastrzeżenie. Pomimo faktu, że PCR jest dość dokładną analizą, możesz uzyskać wynik fałszywie dodatni lub fałszywie ujemny. Według hepatologów lepiej jest zdać test dwa razy w różnych laboratoriach.

    Analiza ilościowa

    Analiza ilościowa w kierunku wirusowego zapalenia wątroby typu B jest również przeprowadzana bezbłędnie, jeśli istnieje podejrzenie obecności HRV w organizmie. Co to są badania ilościowe i dlaczego są potrzebne? Jak sama nazwa wskazuje, analiza pomaga określić ilość czynnika zakaźnego w organizmie. Za pomocą badania lekarz może ocenić nasilenie patologii.

    Ponadto należy przeprowadzić analizę ilościową u osób, które już są poddawane leczeniu. Dzięki niemu możesz określić skuteczność środków terapeutycznych i, jeśli to konieczne, dokonać korekt.

    Jednostką miary wirusa jest ME / ml. Czasami stosuje się DNA / ml (liczba kopii). Średnia wartość wynosi 1 IU / ml = 5 kopii / ml. Jeśli wynik analizy jest mniejszy niż 75 IU / ml, pacjent nie ma HRV.

    Dekodowanie badania ilościowego jest następujące:

    1. Do 2 * 10 5 kopii / ml. Oznacza, że ​​wirus nie jest bardzo aktywny. W takich przypadkach stosunkowo łatwo wyleczyć HRV..
    2. 2 * 10 5 do 2 * 10 6 kopii / ml. Oznacza, że ​​aktywność wirusa jest średnia. Czynnik zakaźny jest dość aktywny, a prawdopodobieństwo przewlekłości procesu zapalnego jest dość wysokie.
    3. 2 * 10 6 do 2 * 10 7. Viremia jest świetna. Aktywność wirusa jest bardzo wysoka, proces zapalny jest reaktywny.

    Dodatkowe badania dotyczące podejrzenia zapalenia wątroby typu B.

    Oprócz PCR pacjent musi przejść test ELISA (enzymatyczny test immunosorbcyjny). Dzięki niemu możesz wykryć przeciwciała przeciwko VRV. Jeśli istnieją przeciwciała, pacjent prawdopodobnie ma chorobę wirusową. Rozważ główne przeciwciała, jednostką miary jest indeks.

    Jednym z najważniejszych jest HbsAb. Przeciwciała przeciw białku powierzchniowemu wirusa są ukryte pod tym skrótem. Kiedy układ odpornościowy wchodzi w kontakt z białkiem BPB, wytwarzane są specyficzne przeciwciała, które przyczepiają się do wirusa i zapobiegają jego przedostaniu się do komórek wątroby..

    Nadal występuje anty-HBc (ogółem) (HBcAb). Są przeciwciałami przeciwko białku jądrowemu wirusa zapalenia wątroby typu B. Ale to nie jest takie proste. Obecność tych przeciwciał może wskazywać, że zapalenie wątroby było w przeszłości. Oznacza to, że obecność tego markera nie oznacza, że ​​proces zapalny istnieje teraz.

    Można również wykryć IgM anty-HBc (HBcAb IgM). Powstają na początkowych etapach rozwoju choroby.

    Jeśli test immunoenzymatyczny wykazał, że dana osoba ma IgM anty-HBc (HBcAb IgM) i anty-HBe (HBeAb), oznacza to, że proces zapalny jest ostry, a zakażenie krwi pacjenta jest bardzo wysokie. Zazwyczaj te przeciwciała powinny być nieobecne..

    Aby ocenić ogólny obraz kliniczny, oprócz PCR i ELISA, pacjentowi można przypisać:

    • Ogólna analiza krwi.
    • Chemia krwi. Badamy poziom enzymów wątrobowych (AST, ALT, fosfatazy alkalicznej, bilirubiny bezpośredniej i pośredniej, GGT). W przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B wzrasta poziom PF.
    • USG wątroby Proces zapalny prowadzi do tego, że narząd staje się obrzęknięty, jego struktura nieznacznie się zmienia, możliwa jest obecność miejsc zwłóknienia.
    • Biopsja wątroby. Zapewnia pobieranie komórek wątroby i ich dalsze badanie histologiczne. Musi być stosowany jako część diagnostyki różnicowej.

    W razie potrzeby można zalecić badanie PCR RNA wirusa zapalenia wątroby typu C, ponieważ przypadki jednoczesnego zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B i zapalenia wątroby typu C są dość częste. Ponadto obie choroby są przenoszone pozajelitowo.

    Co zrobić, jeśli w ciele jest wirus?

    Jeśli wynik testu jakości był pozytywny, a u pacjenta zdiagnozowano wirusowe zapalenie wątroby typu B, musi on przejść kompleksowe leczenie. Przy opracowywaniu schematu środków terapeutycznych brane są pod uwagę wyniki testu na przeciwciała i wyniki ilościowych badań PCR.

    Aby zniszczyć wirusa i zatrzymać proces zapalny, pomagają specjalne leki przeciwwirusowe. Narkotykami z wyboru są. Aby wzmocnić odporność organizmu na czynniki zakaźne, przepisywane są interferony, w tym Interal-P, Intron A, Pegasis, Pegintron.

    1. Hepatoprotectors są przepisywane. Pomagają ustabilizować metabolizm lipidów i białek, zmniejszają aktywność transaminaz wątrobowych, zatrzymują proces zapalny w miąższu wątroby. Również pod wpływem hepatoprotektorów funkcja detoksykacji wątroby jest znormalizowana, synteza żółci wzrasta, a jej przejście ustabilizowane. W przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B wybranymi lekami są Urdoxa, Ursofalk, Liv 52, Karsil Forte, Essential Forte N, Resalyut Pro.
    2. Dieta jest dostosowana. Pacjent musi porzucić produkty, które przeciążają wątrobę. Są to słodycze, tłuste potrawy, potrawy gotowe, pikantne warzywa, kwaśne owoce, świeże wypieki.
    3. Pokazano odmowę napojów alkoholowych, ponieważ zaostrzają one przebieg procesu zapalnego i są słabo połączone z lekami przeciwwirusowymi.

    VRV jest całkowicie możliwe do wyleczenia. Chronizacja procesu zapalnego występuje tylko u 10–20% pacjentów.

    Prognozowanie i zapobieganie chorobie

    Najlepszym sposobem zapobiegania wirusowemu zapaleniu wątroby typu B jest terminowe szczepienie. Odbywa się to natychmiast po urodzeniu, a następnie po osiągnięciu dorosłości. Trudno powiedzieć, jak długo trwa odporność po szczepieniu.

    Początkowo sądzono, że osoba pozostaje odporna na ekspozycję na żylaki przez 5-7 lat po szczepieniu. Ale badania przeprowadzone w latach 80. XX wieku obaliły to. Lekarze stwierdzili, że odporność może trwać do 25 lat. Ale pracownikom służby zdrowia i osobom, których praca wiąże się z kontaktem z krwią i innymi płynami ustrojowymi, zaleca się szczepienie co 5 lat..

    Prognozy dotyczące wirusowego zapalenia wątroby typu B są korzystne. Chronizacja procesu zapalnego jest dość rzadka, szczególnie jeśli dana osoba poprosiła o pomoc w odpowiednim czasie. Jeśli rozpocznie się proces zapalny, prawdopodobieństwo przewlekłej patologii jest dość wysokie.

    Przedwczesne leczenie może prowadzić do różnych konsekwencji. Tak więc przewlekła HRV często prowadzi do rozwoju zwłóknienia, które ostatecznie przeradza się w marskość wątroby.

    Ponadto na tle procesu zapalnego może rozwinąć się rak wątroby, dyskinezy żółciowe, stłuszczenie wątroby, ostre zapalenie pęcherzyka żółciowego, zapalenie dróg żółciowych. Jest jeszcze jedna funkcja. W przypadku BPV pacjent może zostać zarażony wirusem zapalenia wątroby typu D. Replikacja tego drugiego jest możliwa tylko z HBV.

    PCR dla wirusowego zapalenia wątroby typu B: specyficzność metody

    Jedną z najpoważniejszych patologii w XXI wieku była infekcja spowodowana wirusem zapalenia wątroby typu B. Szczepionka została włączona do krajowego harmonogramu szczepień, który chroni osobę przed chorobą natychmiast po urodzeniu.

    Jednak liczba osób cierpiących na skutki spożycia niebezpiecznego mikroorganizmu w milionach. Wirus jest łatwo przenoszony przez niezabezpieczony kontakt seksualny, a także z mikrocząstkami krwi. Dlatego badanie PCR w kierunku wirusowego zapalenia wątroby typu B staje się szczególnie istotne dla rozpowszechnienia wirusa.

    Wskazania do badania

    Technika ta nie jest badaniem przesiewowym, jest stosowana zgodnie z pewnymi wskazaniami klinicznymi. Do diagnostyki masowej zwykle stosuje się badanie surowicy krwi na antygen australijski. Jednak dość duża liczba osób wymaga corocznej diagnostyki PCR wirusa zapalenia wątroby typu B..

    Wskazaniami do badania są:

    • Pozytywny wynik testu HBsAg - obecność antygenów w wirusowym zapaleniu wątroby;
    • ostra infekcja spowodowana przez wirusa;
    • kwantyfikacja miana wirusa;
    • monitorowanie skuteczności terapii;
    • ocena perspektyw taktyki terapeutycznej.

    Jednak w wielu sytuacjach klasyczne badania przesiewowe w kierunku antygenu australijskiego nie zapewniają dokładnego zaufania w obecności choroby. Przez pewien czas wirus jest już we krwi, ale układ odpornościowy jeszcze na niego nie reaguje. Dlatego metodę PCR stosuje się w różnych stanach patologicznych.

    Najistotniejsze są następujące wskazania kliniczne do PCR w przypadku wirusowego zapalenia wątroby typu B.

    1. żółtaczka niewiadomego pochodzenia;
    2. zwiększone aminotransferazy;
    3. przedłużony stan podgorączkowy;
    4. status niskiej odporności;
    5. wyraźne zmiany w wątrobie wykryte za pomocą ultradźwięków;
    6. diagnostyka różnicowa między zapaleniem wątroby;
    7. długotrwały zespół dyspeptyczny.

    We wszystkich sytuacjach klinicznych początkowo przeprowadza się diagnozę w celu ustalenia antygenów wirusa zapalenia wątroby typu B. Jednak z wątpliwymi wynikami, jeśli istnieją oczywiste objawy, które nie mieszczą się w ramach konkretnej choroby, przeprowadza się badanie PCR.

    Istota diagnostyki PCR

    W rezultacie, nawet przy niewielkiej ilości mikroorganizmu w ludzkim ciele, uzyskuje się dokładne, pozytywne wyniki. Wiarygodność diagnozy wynosi 98%, co daje prawie całkowitą gwarancję dokładności badania..

    Materiał biologiczny to krew żylna, oczyszczone komórki limfocytowe lub biopsja wątroby. Tę ostatnią opcję można uzyskać podczas operacji, jeśli zostaną wykryte poważne zmiany narządów bez wyraźnego obrazu klinicznego..

    Przygotowanie i etapy analizy

    Obecność wskazań klinicznych eliminuje potrzebę specjalnego przygotowania się do analizy. Aby uniknąć zniekształcenia wyniku testu, zaleca się przestrzeganie ogólnych zasad pobierania surowicy krwi. Przygotowanie obejmuje:

    • post na czczo - rano nie jest pożądane jedzenie;
    • wykluczenie napojów alkoholowych na 3 dni przed analizą;
    • nie palić rano;
    • nie jedz tłustych potraw 36 godzin przed analizą, w przeciwnym razie wynik PCR będzie nieinformacyjny;
    • oddawać krew rano.

    Wszystkie niuanse szkolenia mają charakter wyłącznie doradczy. Nie ma przeciwwskazań do reakcji łańcuchowej polimerazy na zapalenie wątroby typu B. W pilnej potrzebie badania są przeprowadzane w dowolnym momencie..

    Poniżej znajdują się etapy diagnostyki PCR, biorąc pod uwagę czas potrzebny na zakończenie manipulacji:

    1. Biorąc materiał biologiczny. W 98% przypadków badana jest surowica krwi. W takim przypadku pierwszy etap pobrania próbki do analizy zajmuje nie więcej niż 30 minut. Krew pobrana przez żyłkę.
    2. Dostawa materiału do laboratorium. Krew jest pompowana do specjalnej probówki bez środka konserwującego, jeśli badanie przeprowadza się tego samego dnia. Transport trwa zwykle nie dłużej niż 3 godziny.
    3. Test PCR na zapalenie wątroby typu B. Przeprowadzany jest w molekularnym laboratorium biologicznym. Mieszankę wzbogacającą dodaje się do specjalnego pojemnika, za pomocą którego określa się elementy DNA wirusa. Zwykle zajmuje 4 godziny.
    4. Interpretacja wyników przez asystenta laboratorium. Analiza danych uzyskanych podczas badania. Zwykle nie zajmuje więcej niż 2 godziny.
    5. Kwestia zawarcia.

    W dużych laboratoriach, w których PCR wykonuje się codziennie, wszystkie etapy diagnozy nie trwają dłużej niż 1 dzień. W konwencjonalnych klinikach PCR w kierunku WZW typu B często wykonuje się 1 lub 2 razy w tygodniu w celu oszczędzania odczynników. W takim przypadku czas na uzyskanie wyników badania gwałtownie wzrasta..

    Jeśli diagnoza nie została wcześniej potwierdzona, nie będzie bezwzględnych wskazań do PCR. Oznacza to, że dostęp przez żyłę centralną jest niepraktyczny, ponieważ reakcja łańcuchowa polimerazy na zapalenie wątroby typu B nie jest badaniem przesiewowym.

    W obecności bezwzględnych wskazań związanych z potrzebą kontrolowania wiremii (ilość wirusa we krwi), nakłuwana jest żyła centralna, a materiał jest pobierany z trudnego dostępu. Ta metoda pobierania krwi wymaga znieczulenia i obserwacji w ciągu dnia ze względu na ryzyko możliwych powikłań..

    Rodzaje diagnostyki PCR

    Istnieją dwie opcje badania ludzkiego materiału biologicznego przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy - jakościowa i ilościowa. Różnią się tylko na etapach interpretacji wyników..

    Dzięki analizie jakościowej ustalono tylko fakt obecności wirusa w ludzkim ciele. Wynik będzie wyglądał jak tylko jedna fraza - pozytywna lub negatywna.

    Ta metoda jest dobra do wczesnego wykrywania wirusa w okresie inkubacji, gdy klasyczne badania przesiewowe nie zapewniają jeszcze dokładnych danych na temat obecności przeciwciał. Jest również stosowany w praktyce klinicznej do rozwiązywania wątpliwości w diagnostyce różnicowej różnych chorób..

    Ilościowa analiza PCR w kierunku WZW typu B wymaga uzyskania dokładnych danych na temat wiremii. Lekarz laboratoryjny liczy liczbę kopii wirusa w celu ustalenia obciążenia zapaleniem wątroby. Jest to konieczne do oceny leczenia przeciwwirusowego..

    Jeśli po wyznaczeniu terapii liczba kopii wirusa wzrośnie, konieczna jest korekta zastosowanych leków. Analiza jest ważna w ocenie postępu choroby. Im więcej kopii wirusa będzie we krwi w dynamice choroby, tym bardziej złośliwe i bardziej niebezpieczne będzie uszkodzenie wątroby. W ostrym wirusowym zapaleniu wątroby typu B poziom wiremii wpływa na rokowanie w przewlekłej chorobie.

    Rozszyfrowanie wyników

    Dzięki jakościowej metodzie PCR dla zapalenia wątroby typu B wynik uzyskuje się poprzez ustalenie faktu obecności wirusa w materiale biologicznym. Jeśli zostanie wykryty mikroorganizm, wówczas zostanie wyciągnięty wniosek na temat dodatniej reakcji łańcuchowej polimerazy. Oznacza to, że dana osoba jest chora lub jest nosicielką.

    Badania jakościowe są prostsze, ponieważ nie wymagają liczenia kopii wirusa. Tłumacz może interpretować wyniki takiego badania bez interwencji lekarza. Dlatego technika ta jest często stosowana w regionach wojewódzkich, w których brakuje profesjonalnego personelu..

    Ilościowe określenie wirusa oznacza, że ​​raport z diagnostyki PCR będzie odzwierciedlał nie tylko fakt infekcji, ale także liczbę kopii mikroorganizmu. Technika wymaga obowiązkowej interwencji lekarza, dlatego jest wykonywana tylko w dużych laboratoriach.

    Poniżej znajdują się główne opcje wyników analizy ilościowej:

    • Brak kopii - wynik jest negatywny. Ta opcja jest możliwa, jeśli pacjent jest zdrowy lub wiremia jest mniejsza niż 20 IU / ml, czyli poniżej możliwości diagnostycznych odczynnika. Jeśli wcześniej ustalono zapalenie wątroby typu B, wynik ten wskazuje na wysoką skuteczność leczenia..
    • Mniej niż 10 * 2 kopii. Wynik pozytywny wskazujący na niską wiremię. Choroba istnieje, ale proces leczenia jest udany, a w ostrym zapaleniu wątroby prawdopodobieństwo przewlekłości jest bardzo niskie..
    • Od 10 * 2 do 10 * 8 kopii. Średni wynik. Należy interpretować w zależności od wcześniejszych wyników. Jeśli wcześniej nie przeprowadzono analizy, wynik ten wskazuje na szybki postęp choroby, który wymaga natychmiastowego leczenia. Jeśli ilość wirusa w poprzednich próbkach była większa, wówczas leczenie przebiega ze średnią wydajnością.
    • Ponad 10 * 8 kopii. Jest to najbardziej niekorzystna opcja. Wskazuje na szybki postęp choroby, nieskuteczność środków terapeutycznych i wysokie prawdopodobieństwo przewlekłości w ostrym zapaleniu wątroby..

    Wynik PCR na zapalenie wątroby typu B nie jest przeznaczony dla pacjenta. Jest to potrzebne tylko lekarzowi prowadzącemu, który optymalnie interpretuje dane w oparciu o względy kliniczne. Dlatego nawet przy negatywnej odpowiedzi z laboratorium zawsze musisz skonsultować się z lekarzem.

    Przy wysokiej wiremii nie można odłożyć wizyty u lekarza. Konieczna jest natychmiastowa korekta leczenia, ponieważ od tego zależy życie pacjenta.

    Istnieją przeciwwskazania. Konieczne jest skonsultowanie się ze specjalistą.

    Wirus zapalenia wątroby typu B, definicja DNA (HBV-DNA) Qual. w surowicy krwi

    Oznaczanie DNA wirusa zapalenia wątroby typu B (wirusa zapalenia wątroby typu B) w surowicy krwi metodą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) z wykrywaniem w czasie rzeczywistym.

    Wykryty fragment jest specyficznym miejscem DNA wirusa zapalenia wątroby typu B; specyficzność oznaczania - 100%; czułość wykrywania - 20 IU / ml.

    • Zapobiegawcze badania przesiewowe (DNA wirusa zapalenia wątroby typu B jest najwcześniejszym markerem ostrej infekcji).
    • Badania nad zakażeniem HBsAg-ujemnym.
    • Ankiety Kontaktowe.
    • Diagnoza zapalenia wątroby o mieszanej etiologii - identyfikacja wiodącego wirusa.
    • Identyfikacja etapu aktywnej replikacji wirusa w stanie przewlekłym.
    • Monitorowanie terapii.
    • Marskość wątroby.
    • Osłabienie, złe samopoczucie, zmęczenie, utrata apetytu, nudności, uczucie ciężkości w prawym podżebrzu, powiększenie wątroby, a także ból mięśni, stawów.
    • Żółtaczka, swędzenie skóry, powiększona śledziona, naczyniowe „pająki”, w niektórych przypadkach zaczerwienienie dłoni i stóp.

    Interpretacja wyników badań zawiera informacje dla lekarza prowadzącego i nie stanowi diagnozy. Informacje w tej sekcji nie mogą być wykorzystane do samodiagnozy i samoleczenia. Lekarz dokonuje dokładnej diagnozy, wykorzystując zarówno wyniki tego badania, jak i niezbędne informacje z innych źródeł: historię, wyniki innych badań itp..

    Wirus zapalenia wątroby typu B, DNA (HBV, PCR), jakość.

    Informacje o badaniu

    Diagnostyka PCR

    Wirus zapalenia wątroby typu B (analiza jakościowa)

    Wirusowe zapalenie wątroby typu B - infekcja wirusowa spowodowana wirusem zapalenia wątroby typu B zawierającym DNA (HBV, HBV) z pierwotną zmianą miąższu wątroby. Źródłem infekcji jest chory. Drogi przenoszenia: po transfuzji krwi, od matki do płodu i noworodka, seksualnie, podczas manipulacji z uszkodzeniem integralności skóry i błon śluzowych, w rodzinie skupiają się na mikrourazach (szczoteczki do zębów, nożyczki, grzebienie, myjki, ręczniki, naczynia itp.). Okres inkubacji trwa od 42 do 180 dni. Okres przedterminowy trwa od 1 dnia do 4 tygodni, kiedy następuje niewielki wzrost temperatury, nudności, osłabienie, ból głowy i ból brzucha. Okresowi żółtaczkowemu towarzyszy naruszenie metabolizmu pigmentu: zauważono żółtawe zabarwienie skóry, twardówki, błony śluzowej jamy ustnej, swędzenie skóry, ciemne zabarwienie moczu (kolor piwa) i lekkie stolce. Metoda diagnostyczna PCR jest najbardziej niezawodna i pozwala wykryć DNA wirusa w surowicy krwi pacjenta. Pozytywna analiza jest charakterystyczna dla ostrego stadium choroby i nosiciela wirusa.

    PCR na zapalenie wątroby typu C.

    PCR (lub reakcja łańcuchowa polimerazy) to laboratoryjna metoda diagnozy DNA i RNA patogenu wprowadzona przez Carey Mullis (USA). Tylko jedna cząsteczka znaleziona w skórze lub płynie ustrojowym wystarcza do bardzo czułej analizy PCR w celu zidentyfikowania wirusa patogenu.

    Rodzaje PCR

    Istnieją trzy rodzaje analizy PCR krwi pod kątem przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C - jakościowe, ilościowe i analizy, które określają genotyp wirusa.

    Jakościową analizę PCR w kierunku wirusowego zapalenia wątroby typu C przeprowadza się u tych pacjentów, u których analiza ELISA ujawniła przeciwciała przeciwko HVGS. Wynik jakościowej analizy PCR jest oznaczony słowami „Wykryto RNA” lub „Nie wykryto RNA”. Systemy testowe o czułości co najmniej 50 IU / ml mogą wykryć minimalną ilość patogenu we krwi. Przy niższym stężeniu wirusa analiza może dać wynik fałszywie ujemny. Aby uniknąć błędów, laboratoria specjalizujące się w diagnostyce PCR muszą być wyposażone w systemy testowe o wysokiej czułości. Na przykład laboratorium Invitro stosuje systemy testowe o czułości 15 IU / ml. Pacjenci i lekarze mają prawo zażądać danych dotyczących czułości testu od personelu laboratorium..

    Do określenia stężenia wirusa we krwi (lub stopnia wiremii) konieczna jest ilościowa analiza PCR w kierunku wirusowego zapalenia wątroby typu C. Wyniki mówią liczby. Jeśli w 1 ml krwi znaleziono 2 miliony IU, wynik jest następujący - 2 × 10 * 6 IU / ml. Niektóre laboratoria używają innego wskaźnika - liczby kopii na 1 ml krwi (1 IU to 4 kopie RNA). Okazuje się, że 2 × 10 * 6 IU / ml odpowiada 8 × 10 * 6 kopii wirusa RNA (8 milionów kopii) w 1 ml krwi.

    Genotypowanie określa, do którego z sześciu genotypów należy wirus. To genotyp patogenu wpływa na obraz kliniczny, częstość powikłań i dalsze rokowania dla pacjenta. Prawidłowe określenie genotypu wirusa umożliwia wybór kombinacji leków i określenie czasu trwania leczenia.

    Wskazania do analizy

    Aby potwierdzić obecność HCV, zaleca się analizę PCR w celu wykrycia patogenu i rozpoczęcia leczenia. Wskazania na spotkanie:

    • Pacjent ma objawy zapalenia wątroby.
    • Badania przesiewowe w kierunku badań profilaktycznych.
    • Konieczne jest zbadanie osób mających kontakt z pacjentami z zapaleniem wątroby.
    • Rozpoznano zapalenie wątroby mieszanego pochodzenia i należy ustalić główny czynnik sprawczy.
    • Określono poziom aktywności reprodukcyjnej patogenu u pacjentów przewlekle..
    • U pacjenta zdiagnozowano marskość wątroby.
    • Konieczna jest ocena skuteczności terapii.

    Przygotowanie do diagnozy PCR zapalenia wątroby

    Zabieg wykonuje się rano na czczo, krew pobierana jest z żyły..

    Pacjent musi przestrzegać następujących zasad:

    • Nie jedz jedzenia na 10 godzin przed zabiegiem. Dozwolona jest tylko czysta woda..
    • Nie pal 4 godzin przed manipulacją i nie pij alkoholu na dzień przed analizą.
    • Unikaj stresu fizycznego i psychicznego przed zabiegiem.
    • Nie bierz leków przez 2 dni przed pobraniem krwi. Jeśli pacjent z jakiegokolwiek powodu zażył lek, należy o tym powiadomić asystenta laboratoryjnego (stosowanie niektórych leków powoduje błędnie pozytywny wynik).

    Dekodowanie wyników badań PCR

    Odszyfrowanie testu ELISA i analizy PCR jest zadaniem hepatologa lub specjalisty chorób zakaźnych. Wymagane są również wyniki biopsji, analizy biochemicznej krwi i ultradźwięków. Odszyfruj wyniki analizy PCR może być tylko wykwalifikowanym lekarzem, który powinien przepisać terapię na ich podstawie. Tabele do dekodowania miana wirusa zapalenia wątroby typu C podano poniżej.

    Analiza jakościowa. Deszyfrowanie

    WykrytoPacjent jest zainfekowany, ponieważ wirus RNA znaleziony w materiale biologicznym.
    Nie znalezionoPacjent nie jest zarażony lub ilość RNA wirusa jest poniżej limitu czułości.

    Analiza ilościowa. Deszyfrowanie

    Nie znalezionoOsoba jest zdrowa. Wirusowego RNA nie znaleziono w biomateriałach lub jego stężenie jest poniżej granicy czułości.
    Do 1,8 * 10 ^ 2 IU / mlStężenie RNA wirusa jest poniżej zakresu kwantyfikacji. W takim przypadku należy zachować ostrożność przy interpretacji wyniku. Często wymagane są wielokrotne badania..
    Do 8 * 10 ^ 5 IU / mlNiski poziom miana wirusa w zapaleniu wątroby typu C. Z reguły spadek stężenia wirusa wskazuje na skuteczne leczenie.
    Większy niż 8 * 10 ^ 5 IU / mlWysokie obciążenie wirusowe wirusem zapalenia wątroby typu C..
    Większa niż 2,4 * 10 ^ 7 IU / mlPonieważ ilość RNA wirusa jest poza górną granicą zakresu kwantyfikacji, niemożliwe jest określenie poziomu miana wirusa. Potrzebujesz powtórnego testu z rozcieńczeniem próbki krwi.

    Wykryty RNA określonego genotypuWirus zapalenia wątroby typu C należący do określonego genotypu i podtypu został znaleziony w biomateriale pacjenta. Wynik jest oznaczony cyframi i literami łacińskimi: 1a, 2b itp. Istnieje 7 genotypów i 67 podtypów. Z 7 genotypów pierwsze 3 znajdują się w Rosji.
    Wykryto RNA wirusa zapalenia wątroby typu C.RNA atypowego genotypu wirusa znalezionego w Rosji znaleziono w biomateriale pacjenta, dlatego wymagane są dodatkowe badania.
    Nie znalezionoOsoba jest zdrowa lub w jej krwi jest bardzo niskie stężenie RNA wirusa.

    Czasami analiza PCR jest negatywna, ale test ELISA wskazuje na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi. Oznacza to, że osoba, która miała ostre zapalenie wątroby typu C, była w stanie samodzielnie wyzdrowieć. Około 20 przypadków infekcji z silną opornością organizmu infekcji kończy się spontanicznym wyleczeniem.

    W niektórych sytuacjach wyniki precyzyjnej analizy PCR mogą być zniekształcone:

    1. Naruszenie reżimu temperaturowego i innych warunków transportu krwi do laboratorium.
    2. Zanieczyszczenie próbki krwi.
    3. Obecność śladów heparyny i innych antykoagulantów we krwi.
    4. Obecność inhibitorów w biomateriale (reakcja łańcuchowa polimerazy spowalnia lub zatrzymuje się).

    Korzyści z analizy PCR

    Po pierwsze, jest to metoda wczesnej diagnozy, która pozwala zidentyfikować materiał genetyczny wirusa. Analiza ELISA pozwala określić tylko substancje wytwarzane przez organizm w odpowiedzi na infekcję (immunoglobuliny). Od momentu zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C do wystąpienia odpowiedzi immunologicznej może upłynąć kilka tygodni lub nawet miesięcy, aw tym okresie test ELISA jest nieskuteczny. Analiza PCR już w pierwszym tygodniu infekcji daje odpowiedź.

    Drugą zaletą analizy PCR jest niskie prawdopodobieństwo błędu. W badaniu określa się sekcję materiału genetycznego, która jest charakterystyczna tylko dla jednego rodzaju patogenu, co umożliwia wykluczenie fałszywego wyniku. Analiza ELISA wykazuje obecność przeciwciał uwalnianych przeciwko różnym wirusom (przeciwciała krzyżowe).

    Wady PCR

    Bez względu na to, jak skuteczne jest badanie, ma ono swoje wady:

    • Podczas badania ChRL replikowany jest materiał genetyczny patogenów (w tym nieożywionych), co prowadzi do zniekształcenia wyników. Aby ocenić skuteczność leczenia za pomocą analizy PCR, drugie badanie przeprowadza się co najmniej 2 miesiące po poprzednim. Ciało pacjenta musi być „oczyszczone” z martwych wirusów.
    • Systemy testowe określają część genomu wirusowego, która teoretycznie może należeć do innych wirusów lub mikroorganizmów, dlatego istnieje prawdopodobieństwo wyniku fałszywie dodatniego.
    • Szybka mutacja wirusów czasami przewyższa zdolność systemów testowych do określania genomu patogenu, dlatego istnieje szansa na fałszywie negatywną odpowiedź.

    Producenci laboratoryjnych systemów testowych regularnie je testują, sprawdzając, w jaki sposób systemy reagują na reakcje krzyżowe lub jakikolwiek genotyp wirusa..

    Cena analizy PCR dla WZW typu C.

    W instytucjach rządowych analizę można wykonać za darmo, wymagane jest jedynie skierowanie od hepatologa lub specjalisty chorób zakaźnych.

    Płatne badania są dostępne we wszystkich większych miastach Federacji Rosyjskiej. Na cenę ma wpływ rodzaj badań, zastosowany sprzęt, czas potrzebny na analizę.

    W Moskwie i Petersburgu wysokiej jakości analiza PCR na WZW typu C kosztuje od 600 do 900 rubli, w regionie - od 300 do 800 rubli.

    Ilościowa analiza PCR w kierunku WZW typu C kosztuje od 17 000 do 22 000 rubli, w przypadku WZW typu B - od 1200 do 10 000 rubli.

    Aby uzyskać wiarygodne wyniki analizy PCR w kierunku WZW typu C, należy skontaktować się wyłącznie z renomowanymi laboratoriami. W tym przypadku pytanie o koszt badań znika w tle.